本文对伤寒LPS-PHA快速诊断试剂进行了现场考核和临床验证,15个单位共对临床确诊或血培养阳性的伤寒、副伤寒病人血清671例,LPS-PHA检测与Widal氏试验作比较,结果证明:92例血培养伤寒沙门氏菌阳性者血清LPS-PHA检测阳性84例(91.31%),而Widal氏试验阳性66例(71.74%).623例临床确诊病人血清LPS-PHA阳性率为94.35%,相应Widal氏试则验为83.99%,LPS-PHA对血培养阳性和临床确诊者与Widal氏试验的检出率在统计学上有显著性差异(X2=7.9745,P＜0.01),而对741份其他肠道疾患或其他病种的血清(1.48%)以及1357份正常人血清(0.74%)的交叉率又显著低于Widal氏试验(7.42%和3.76%).特别对早期病人(发病7天内)的诊断率亦显著高于Widal氏试验,表明LPS-PHA试剂对诊断伤寒、副伤寒具有较Widal氏试验更高的敏感性、特异性和快速性,是一种适合基层推广应用的较为理想的伤寒、副伤寒诊断试剂.
目的:为了了解目前艾滋病抗体诊断试剂的敏感性、特异性等性能,我们利用不同原理的艾滋病病毒抗体诊断方法 进行综合评价.方法:使用基础血清盘、干扰样本血清盘、线性稀释系列血清盘、精密度血清盘、CAP血清盘、商业阳转血清盘这六种血清盘对艾滋病病毒快速检测方法 、酶联免疫(ELISA方法)和化学发光免疫法(CLIA)三种方法的诊断试剂进行分析,其分析的内容主要是诊断试剂的敏感性,特异性,分析灵敏度分析,特异性以及精密度等指标.结果:我们对目前被有的六种抗体进行测试,发现ABCDEF这六种试剂在适用基础血清盘进行评估的前提下,它们的敏感性为百分之百,特异性大于97.5％.在使用商业阳转血清盘进行评价的前提下,A试剂的阳性率为18.2％,B试剂的阳性率为16.7％,C试剂的阳性率为33.3％,D试剂的阳性率为37.9％,E试剂的阳性率为19.7％,F试剂的阳性率为18.2％.结论:我们发现所有参与研究的诊断试剂当中,敏感性和特异性最高的两种试剂是快速诊断试剂以及ELISA试剂,敏感性相对较高的是抗原抗体检测试剂,但CLIA试剂法在HIV抗体中具有更好的临床价值,准确性、特异性、灵敏度均高,CLIA灵敏度相对ELISA稍高.因此,以上三种试剂可以作为抗体筛选试剂.
1919年的西班牙流感夺去38万日本国民的生命[1],在现代社会,季节性流感流行带来的超额死亡仍是一个重大的公共卫生问题.日本每年有成千上万儿童因流感或流感相关疾病住院[2,3].1997年香港发生人禽流感感染事件,禽流感病毒H5N1首次跨越物种障碍传播至人,随后禽鸟类发生禽流感流行,将人类对禽流感的关注提高到一个前所未有的高度.
艾滋病成为21世纪重大疾病之一,如何快速及时地筛检出艾滋病毒(HIV)携带者,已成为当务之急.笔者将抗-HIV快速诊断试剂金标法(斑点胶体免疫金层析试验 DIGCA)与酶联免疫(ELISA)法作了对比实验.结果发现,在灵敏度上金标法稍优,在特异性方面,金标法大大优于ELISA.1.材料与方法:抗-HIV ELISA试剂盒(上海科华公司出品,批号2000706;北京金豪有限公司出品,批号20000523);HIV金标试剂条(北京金豪有限公司出品,批号000101).卫生部全国血站系统免疫检验2000年检验室间质量评价质控血清15份(0051～0055,0061～0065,0071～0075);卫生部不定量临床检验中心定值参比血清2份,每毫升2个临检中心单位(2 NCU/ml),每毫升4个临检中心单位(4 NCU/ml),批号分别为006和002;献血员筛选过程中ELISA检测试剂为阳性,经West-Blot确诊为阴性的标本8份.即25份标本中阳性标本12份,阴性标本13份.每份标本均同时采用2种方法检测.金标法取金标试纸条加样区浸于血液中约10 s,肉眼观察,记录阳性出现时间.结果判断以测试条上呈现两条红色线条为阳性,仅呈现1条红色(阴性对照线)为阴性,阴性标本延长观察至30 min.ELISA法按说明书操作,酶标仪双波长检测(检测波长450 nm,参考波长630 nm)A值,以样本吸光度/阳性判断值(S/co)≥1为阳性,S/co＜1为阴性[1].
感染个体进行 HIV 抗体的检测对 HIV 的诊断和控制至关重要，传统的血液检测法对医院的环境设施及相关医务人员水平的要求较高，也存在交叉感染的危险。研究表明， HIV 感染者的唾液或口腔黏膜渗出液中几乎不含 HIV 病毒，但含有抗 HIV 抗体，并且检出率高。这一发现为艾滋病检测提供了一个全新的发展方向[1-2]。在以口腔分泌物为样本的 HIV 抗体诊断试剂研发领域，虽然国内外曾有报道，但国内至今可成熟应用到临床检测的试剂非常少见。本研究通过工艺摸索及优化，建立了一种基于口腔黏膜渗出液样本检测 HIV1/2型抗体的诊断方法（免疫分析法），为临床提供了适用于 HIV 抗体检测的安全、无创、快速诊断试剂。研制的检测试剂可广泛用于高危人群的流行病学调查和监测，对推进社区医疗和家庭 POCT（point of care testing）在传染病诊断领域的发展具有重要意义。
目的 评价快速检测法在细菌性阴道病(BV)诊疗中的应用价值.方法 对851例妇科阴道分泌物进行BV快速诊断试剂检测和生理盐水直接涂片镜检.结果 BV快速检测法阳性率26.6%,涂片镜检线索细胞阳性率21.7%;霉菌性阴道炎中伴BV阳性约30.7%,滴虫性阴道炎中伴BV阳性约18.4%.结论 BV快速诊断试剂法操作简便、快速、特异性较强,与涂片镜检法合用可显著提高BV及霉菌或滴虫性阴道炎伴发BV的检出率.
细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)是由于阴道微生态环境菌群与分泌物生化性质变化所引起的一种阴道炎症,是育龄期妇女常见的疾病之一,感染率为15%～50%[1],有近半数患者可无症状且治疗后易于复发.在妇科BV 会引起宫颈炎、慢性盆腔炎、双侧输卵管阻塞而致不孕等;在产科BV 可导致胎膜早破、羊膜腔感染、绒毛膜羊膜炎、产后子宫内膜炎、新生儿感染等,故对细菌性阴道病及早做出诊断和进行治疗非常重要.BV诊断的金标准是Amsel临床诊断标准(简称Amsel)[2].但在临床实践中操作较为繁琐,影响因素较多,且阳性标准难以统一[3].为此,我们采用美国PIP Test Card技术和BV Blue快速诊断试剂,分别检测阴道分泌物中的脯氨酸氨基肽酶(PIP)及唾液酸酶(Sialidase)的活性,并与Amsel结果进行对比分析,探讨其在BV诊断中的应用价值.
目的 针对目前艾滋病病毒(HIV)感染诊断的检测策略进行评价.方法 应用991份样本(男男性行为者、吸毒人群、丙型肝炎病毒抗体阳性人群、自愿咨询检测人群、近期感染样本)进行评估,将快速检测(RT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行顺序排列组合,评价单一试剂检测、双试剂检测和三种试剂检测的策略.结果 对925份样本进行检测,单一试剂检测策略敏感性96.55％～99.31％,特异性98.84％～99.87％,符合率98.59％～99.35％;双试剂检测策略敏感性96.55％～97.24％,特异性99.74％～100％,符合率99.24％～99.46％;应用三种RT试剂顺序检测策略的敏感性为95.86％,特异性为100％,符合率为99.35％.近期感染样本检测策略:第四代ELISA抗原抗体检测试剂与蛋白印迹试验(WB)组合确证3份阳性、14份不确定;第四代ELISA抗原抗体检测试剂与核酸检测组合检确证22份阳性.结论 对评估人群样本检测,应用单试剂检测策略均存在假阴性和假阳性的情况,应用双试剂检测策略特异性增加;三种RT检测方法组合与两种检测方法组合策略比较,特异性方面没有差异,敏感性降低;近期感染样本应用ELISA抗原抗体检测试剂组合核酸检测,检测效率较高,可以有效缩短窗口期.
1 概况艾滋病病毒(HIV)抗体快速诊断方法是目前常用的HIV抗体检测方法之一.有免疫斑点、免疫层析及凝集试验,主要包括硒标记法、金标记法和凝集(明胶颗粒凝集、乳胶凝集和自身红细胞凝集)法.
随着分子生物技术的研究不断深入,单克隆抗体在免疫学、医学、生物学的应用越来越广泛.为了能够对甲型肝炎病毒(HAV)感染的早期诊断及治疗提供快速诊断试剂,我们建立了HAV单克隆抗体杂交瘤细胞株.现将实验结果报告如下.
目的:评价快速诊断试剂测定新生儿促甲状腺激素(TSH)的分析性能.方法:分别用化学发光免疫测定试剂盒、时间分辨免疫荧光测定试剂盒和金标快速检测试剂盒测定相应要求标本的TSH含量.结果:金标快速检测与时间分辨免疫荧光测定及化学发光免疫测定比较,检测效果更好,特异性与敏感性都比较高.结论:金标快速检测测定TSH具有重复硅好、可报告范围宽、灵敏度高等优点,适合于临床应用.
恶性疟原虫是引起人类疟疾的主要病原体之一,采用基于恶性疟原虫富含组氨酸蛋白2(Plasmodiumfalciparum histidine-rich-protein 2,PfHRP2)抗原的快速诊断试剂(rapid diagnostic test,RDT)进行诊断是诊断恶性疟原虫感染的特异性方法,但表达该抗原的pfhup2基因呈现明显的多态性,甚至表达缺失,导致试剂的灵敏度降低,其临床实用性受到质疑.该文对pfhrp2基因多态性研究及基于PfHRP2抗原的恶性疟原虫诊断试剂评价进行综述,为恶性疟原虫的流行病学研究和临床诊断试剂的选择提供依据.
溶血曼氏杆菌常引起哺乳类动物呼吸道感染,偶可致人类呼吸道感染及败血症[1].其生物型A血清型1(A1)是主要的致病菌,临床表现有发热、咳嗽、鼻腔分泌物增多、呼吸窘迫,该菌引起的疾病病死率高,但发病机制尚不明确[2].了解其致病机制对研制疫苗、制备快速诊断试剂,以达到预防、快速诊断及治疗目的有重要意义.
应用艾康生物技术(杭州)有限公司研发的淋病快速诊断试剂(胶体金法),对2001年1月～4月在我院STD门诊就诊的300例患者的分泌物进行了淋病检测,并同时进行淋球菌培养,以此来验证淋病快速诊断试剂(胶体金法)的特异性和敏感性.此外还对部分患者进行解脲支原体、人型支原体、沙眼衣原体的检测,以便观察其它病原体的存在对淋病快速诊断试剂的检测有无干扰作用.
衣原体感染的实验室诊断方法有衣原体细胞培养、抗原检测和PCR方法.目前,最常用的方法为抗原检测方法,尤其是免疫层析法.我们用一种彩色乳胶免疫层析法快速诊断试剂,与荧光定量PCR方法平行检测了168例性病门诊患者的宫颈或尿道拭子标本,评估该试剂盒在临床检测中的性能.
HIV抗体的实验室检测方法较多,主要有蛋白印迹法、PA法、ELISA法等.其中蛋白印迹法,虽然准确,特异性强,但操作过于复杂,并不适用于初筛实验室使用.PA法、ELISA法虽可用于初筛检测,但检测所需时间较长,而且ELISA法还需使用酶标仪等仪器.
目的 比较3种实验室检测方法在疟疾诊断中的优缺点,为疟疾诊断提供参考依据.方法 分别采用镜检、快速诊断试剂和巢氏PCR 3种检测方法对收集到的222份疟疾样本进行检测,并对检测方法及结果进行比较分析.结果 综合3种检测方法,222份疟疾样本最终确诊220例,阳性率为99.10％,其中镜检阳性率为93.24％,快速诊断试剂检测阳性率为94.59％,巢氏PCR检测阳性率为96.40％.以最终诊断结果为金标准,镜检、快速诊断试剂和巢式PCR灵敏度分别为94.09％,95.45％,97.27％.结论 镜检、快速诊断试剂和巢氏PCR 3种检测方法各有优缺点,建议三者结合起来提高疟疾诊断的效率.
膜免疫层析一步法是近年发展起来的快速诊断病原体的一种方法.该方法操作简单快速,结果易于判定.其原理是以条状微孔滤膜为载体,通过渗透、毛细管作用使样本在层析条上泳动,使样本中的待测物与层析材料上相应的受体发生特异高亲和性的免疫反应,用于快速诊断O1群霍乱弧菌的金标法试剂就是根据这个原理而制成.
目的 通过采集2014年1月-2016年10月济宁地区的疟原虫阳性诊断数据,对RDT胶体金法在疟疾低传播区的应用进行评估.方法 本研究包括济宁地区272名输入性发热的疑似患者数据.采用广州万孚疟疾快速诊断试剂(胶体金法),进行快速而简单的检测,然后以PCR结果为标准,并与显微镜镜检结果进行比较分析.结果 272份血样采用镜检法、RDT胶体金法和PCR检测疟疾感染,阳性率分别为13.6％、15.1％和14.3％,三种检测方法阳性率差异无统计学意义(x2=0.89,P＞0.05);以PCR为标准,镜检法漏诊率5.1％,误诊率5.1％,灵敏度94.9％,特异性100.0％,阳性预测值100.0％,阴性预测值99.1％.RDT胶体金法漏诊率0,误诊率4.9％,灵敏度97.4％,特异性98.7％,阳性预测值92.7％,阴性预测值99.6％.结论 在疟疾低发病和低传播地区,疟原虫RDT胶体金法在检测输入性疟疾感染较显微镜镜检有更高的灵敏度和阴性预测值,可作为显微镜检查的辅助工具,适于在基层大规模的推广应用.
目的 了解恶性疟治疗与虫体靶物检测抗原衰减情况,评估疟疾快速诊断试剂对疟疾治疗效果的考核价值.方法 对1例输入性恶性疟患者经过青蒿素类药物联合治疗,用快速诊断试剂检测.结果 患者治疗第4天常规镜检疟原虫阴性,在镜检虫体阴转后的第2、7、12、15天,快速诊断试剂检测结果均为阳性,第18天为弱阳性,第23天为阴性.结论 检测恶性疟的快速诊断试剂,对恶性疟患者治疗效果的考核有一定参考价值,但若了解恶性疟患者治疗后的红细胞内疟原虫消失情况,仍需进行病原学镜检.
