本文以头孢克洛作为残留物为例说明清洁验证中残留物检测分析方法的验证.目的:建立一种快速检测头孢克洛清洁残留的方法,有效地控制产品的交叉污染.结果:此方法专属强,头孢克洛的检测限和定量限分别为41.64ng/ml和83.28ng/ml;浓度在82.84～248.51ng/ml低浓度范围内线性关系良好(r=0.9971),棉签加样回收率平均为93.60%,取样回收率平均为81.94%.结论:用HPLC法测定头孢克洛的残留灵敏度高,是一种快速可靠的质量控制手段.

目的 建立甲钴胺片清洁验证分析方法 及取样方法 .方法 采用高效液相法,以Hypersil ODS2-C18(5μm,4.6×150 mm)为色谱柱,以0.05 mol/L乙酸铵溶液-乙腈(83:17)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为266 nm,进样量为20 L,柱温30℃.结果 甲钴胺对照品溶液在检测浓度0.03~1.60μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999),且回收率符合要求(回收率为99%).结论 该方法 简便、准确、重复性好,灵敏度高,可用于甲钴胺片清洁验证药品残留量的检测.

目的 药品固体制剂生产设备生产结束后,制定清洁消毒规程清洁消毒并进行清洁验证.方法 制剂GMP清洁验证工作中清洁消毒规程的制定,可接受标准的确定,检验方法的选择,清洁有效期确定及再验证.结果与结论 固体制剂生产设备清洁消毒的制定必须满足清洁验证.

目的：建立清洁验证中残留物非诺贝特含量测定的高效液相色谱法。方法：色谱柱为 Agilent ZORBAX SB-C18（150 mm×4.6 mm，5μm），流动相为水（磷酸调节pH至2.5）-乙腈（30∶70），检测波长：286 nm，流速：1.0 mL/min，柱温：25℃，进样量：20μL。结果：非诺贝特在0.09～0.90μg/mL范围内线性关系良好， r2=0.9994；回收率：99.69%，RSD =0.16%（n=9）。结论：该法操作简便、结果准确，可以用于清洁验证残留物非诺贝特的定量分析。

设备的清洁工作是按照企业制定好的清洁规程,从设备尤其是从设备直接接触药品的表面,如压片机的冲模和包衣机包衣罐内表面清除可见及不可见残留物,防止污染和交叉污染,保证药品质量.而设备的清洁验证就是对企业所制定的清洁规程进行确认的过程,是对清洁规程的科学性和合理性进行证明,保证活性成分、清洁剂(消毒剂)、微生物等限度控制在可接受标准内,不影响下批产品的质量.

目前许多企业在实施GMP过程中,都遇到一个难题,就是如何进行清洁验证.按GMP要求,企业必须对制药设备的清洁方法进行验证,以确认清洁方法的有效性.但依照目前国内现有的技术水平,很难找到一种合适的验证方法.国外进行清洁验证,比较常用的验证方法主要有HPLC法、UV/Vis分光光度法和TOC(Total Organic Carbon,总有机碳)法,这些方法都可用来证明设备已清洁,基本上无残留药物和清洁剂.

本文主要对非无菌原料药生产设备清洁验证进行了总述,包括清洁验证的定义、开发、准备、实施及再验证等,为非无菌原料药生产设备清洁验证初学者提供参考.

目的:对唑来膦酸生产所用设备进行清洁验证分析方法和取样方法研究.方法:采用HPLC法对唑来膦酸中主成分唑来膦酸进行分析方法和取样研究.结果:唑来磷酸的定量限为1.0μg/mL,检测限为0.824μg/mL,线性范围:4.12μg/mL～41μg/mL,取样回收率为96.6％;结论:唑来膦酸的分析方法和取样方法有效可行.

目的：建立清洁验证中硝酸益康唑含量测定的高效液相色谱法(HPLC)。方法检测波长：235 nm；柱温：30℃；流动相：乙酸铵溶液(2%)-乙腈-甲醇(38：30：32)；擦拭溶剂：乙醇。结果硝酸益康唑在5.80~232.07μg/ml范围内线性关系良好， r=1.0000。平均回收率为99%， RSD为0.3%(n=6)。结论本方法简便、快速、准确，可以用于硝酸益康唑清洁验证中残留物硝酸益康唑的定量分析。

目的：建立依帕司他含量测定的UV法。方法检测波长292 nm,溶剂：无水乙醇。结果依帕司他在2.67~53.74μg/ml范围内线性关系良好, r=1.0000。平均回收率为99.60%, RSD为0.2%(n=6)。结论本方法简便,准确,可以用于依帕司他清洁验证中残留物依帕司他的定量分析。

以实例介绍中药制剂多品种共线的清洁验证,从目标产品的选择、指标物质的确定、验证接受标准和分析方法4个方面阐述中药制剂的清洁验证.将中药制剂中的浸膏或浸膏干粉整体作为验证的标记成分,并以全波长扫描的方法对该标记成分进行分析,是一种科学、合理且经济的验证策略.

目的:制定乳化机清洁方法,对方法进行验证.方法:目测乳化机清洗后的状态,测定淋洗水的物理常数及乳化机内表面微生物限度,同时用HPLC法测定残留物主要成分含量.结果:所有检测结果均在清洁合格标准之内.结论:该清洁方法可靠易行,符合清洁要求.

2011年国家颁布新修订的《药品生产质量管理规范》,对药品生产中如何防止污染与交叉污染提出了更加明确的要求.药品生产后必须对相应设施采取一定的程序进行清洗,防止药物成分残留到下一批产品中,形成交叉污染,影响产品质量,甚至造成质量事故.而清洁验证是证实清洗程序合理性的必要技术手段.目前,部分药品生产企业在清洁验证实施中存在着验证目标产品选择不当、残留限度确定不准确、验证状态难以保持等多方面的问题.本文从清洁验证的范围、常规要求、残留物接受限度的确定、产品与设备评估等方面对清洁验证进行全面的阐述.

对生产结束后按清洁规程对系统进行清洁,然后进行清洁灭菌效果的取样检测无菌、内毒素、残留量等各项检测项目均符合标准,表明现行的清洁规程能有效地清洁生产系统及设备,防止交叉污染,保证下批产品规定的疗效、质量和安全性的状态,符合GMP生产要求.在产品生产后,若残留活性成分及其降解产物、辅料等,直接进入下批生产过程,必然对下批产品产生不良影响,根据GMP及《药品生产验证指南(2003)》[1]的要求,必须对其生产系统及设备的清洁方法进行定期的清洁验证,冻干粉针剂具有生产工艺相对复杂、其清洁验证难点在于残留、无菌取样方法与取样点的确定,对配液灌装系统进行取样点分析确定、对取样与检验方法进行验证,得出真实可靠的结果.

目的：建立板蓝根颗粒清洁验证的HPLC法。方法：色谱柱为C18柱；流动相为甲醇：0.02%磷酸水溶液（7∶93）；检测波长245nm；流速0.8ml/min；柱温30℃；进样量10μL。理论板数按R，S-表告依春峰计应不得低于5000。结果：板蓝根颗粒中表告依春的含量在3.9～95μg/ml （A=85322C-72006，r=0.9995）内呈良好线性关系，平均回收率102.80%，RSD 1.22%；表告依春的残留量在0.04～1.0μg/ml（A=90115C-13204，r=0.9997）内呈良好线性关系。结论：方法简便，稳定可靠，可以用于板蓝根颗粒中表告依春的质量控制；清洁后水样中表告依春的残留量低于限度。

目的：埃索美拉唑钠合成中间体清洁验证残留限度检查方法学研究。方法：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18，4.6mm×150mm，5μm；以乙腈-磷酸盐缓冲液（pH7.6）（50∶50）为流动相；流速1.0mL·min-1；检测波长302nm；进样量10μL。结果：中间体的线性范围为0.06μg·mL-1～1.5μg·mL-1；定量限和检出限分别为0.24ng和0.08ng；平均回收率为89.29%，RSD为1.8%。结论：本方法简便、快速、准确、精密度高、回收率好，可用于中间体的清洁验证。

目的:建立格列美脲清洁验证分析方法及取样方法.方法:采用色谱柱:Zorbax SB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-0.01mol/L 磷酸二氢铵溶液(70∶30)pH 至3.5;检测波长为228nm;流速1mL/min.结果:格列美脲溶液对照品在0.1μg/mL 至40μg/mL 呈良好的线性关系,r=0.9999.并且采用该方法取样,回收率可达77%.结论:该方法简便、灵敏、专属性强,可用于格列美脲片清洁验证药品残留量的检测.

随着制药工艺技术的进步和生产成本的提高，制药企业在竭力确保药品质量的同时，正在平抑高额的生产成本、简化冗长的清洁验证程序，以提升其在本行业中的竞争力。近年来，总有机碳（TOC）分析法[1]逐渐被应用于制药设备清洁的验证过程中。为此，本文从TOC分析法在制药设备清洁验证过程中的应用及其限度等方面进行分析，探讨其在制药设备清洁验证过程中的应用价值。

目的 利用总有机碳(total organic carbon,TOG)分析仪建立血液制品清洁验证分析方法.方法 制备碳浓度为5、10、15 ppm的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)溶液,检测TOC值,并计算回收率,验证方法的准确性;制备6份碳浓度为10 ppm的BSA溶液,检测TOC值,计算相对标准偏差(relative standard deviation,RSD),验证方法的重复性;制备碳浓度分别为O、1、2.5、5、10、15和20 ppm的BSA溶液,检测TOC值,验证方法的线性;测定10次TOC检测用水的TOC值,计算SD,确定方法的检测限(limit of detection,LOD)和定量限(limit of quantitation,LOQ);制备碳浓度分别为0、1、2.5、5、10、15和20 ppm的BSA溶液,先以从低到高浓度,再以从高到低浓度顺序分析,检测TOC值,分别计算回归曲线决定系数,确定残留效应;分别在不锈钢和玻璃材质上擦拭取样,检测TOC值,计算回收率及RSD.对清洁后的血液制品生产用设备和器具擦拭取样,检测TOC值,确认清洁效果.结果 3个碳浓度的BSA溶液TOC值回收率均在90％～110％之间,RSD值均小于5％;6份BSA溶液的TOC值的SD为0.202 ppm,RSD为2.13％;碳浓度在0～ 20 ppm范围内的BSA溶液的加样TOC值与测得TOC值呈良好的线性关系,R2=0.999 5;检测用水的10次TOC检测值的LOD和LOQ值均明显低于10 ppm;两条回归曲线的决定系数的RSD为0.03％;不锈钢和玻璃材质擦拭取样的TOC检测值最低回收率分别为74％和77％,不同工作人员检测结果RSD均≤20％.血液制品TOC检测擦拭法清洁验证结果均低于2μg/cm2.结论 TOC检测法具有良好的准确性、重复性、灵敏度、线性,血液制品清洁残留量均低于残留限度,达到预计的清洁效果.该方法快捷简便,适用于血液制品的擦拭法清洁验证.

目的 证明总有机碳(total organic carbon,TOC)检测法可用于无细胞百日咳疫苗生产中的清洁验证,评价清洁方法的有效性.方法 对TOC检测法的线性、精密性(重复性及中间精密性)、准确性、检测限(LOD)和定量限(LOQ)、耐用性进行验证.取不同碳浓度(20、40、80 ppm)的无细胞百日咳精制品稀释液,分别滴于玻璃、不锈钢、硅胶及塑料4种样板的表面,采用擦拭和淋洗两种方式取样,进行TOC检测,计算残留物回收率.采用TOC法对无细胞百日咳疫苗生产用具清洁效果进行评价.结果 蔗糖浓度在0.25～8mg/L范围内,与TOC值呈良好的线性关系,线性回归方程为y=1.071 7x-0.2063,R2=0.999 8;重复性及中间精密性RSD值均＜10％;准确性的平均回收率为99％,RSD为2.07％;超纯水的LOD及LOQ分别为24.1和80.2 μg/L,棉签的LOD及LOQ分别为56.8和189.4 μg/L;供试品溶液于常温下放置0、4、8、12、16、20、24、48 h后的TOC值呈逐渐降低趋势,RSD为5.66％;4种材质的淋洗和擦拭取样检测结果的RSD均＜15％,回收率均在50％ ～ 120％之间.无细胞百日咳疫苗生产器具经擦拭和淋洗取样检测的残留量均≤1.5 μg/cm2.结论 TOC法可用于无细胞百日咳疫苗生产的清洁验证,证明在百日咳生产过程中所使用的清洁方法是有效的,该方法可广泛用于疫苗生产中的清洁验证.

1概述药品生产企业必须严格按GMP(<药品生产质量管理规范>)要求组织生产与管理,以保证药品符合质量标准要求,保障药品有效性与安全性.随着CMP管理工作不断深入,验证工作也需做的更细化,尤其是各类清洁验证,对于洁净区各工序生产更为重要.卫生不符合要求,很容易造成污染与交叉污染,最终影响药品生产质量.

目的 证实总有机碳法确实可以应用于中药产品的清洁验证,并建立总有机碳(TOC)中药产品清洁验证方法.方法 测定复方丹参装囊滴丸总有机碳量,结合方法学验证数据与检测实例评价总有机碳法用于清洁验证的效果.结果 总有机碳法方法学验证结果符合人用药物注册技术要求国际协调会(ICH)关于方法学实验的相应指导原则的(Q2B)方法学验证要求.总有机碳法与超高效液相色谱法实例对比,检测结果更为准确.结论 总有机碳法可以用于复方丹参装囊滴丸这一中药产品的清洁验证,并据此推论,总有机碳法可以用于部分中药的清洁验证.

目的 :建立清洁验证中残留物盐酸米那普仑含量测定的高效液相色谱法.方法 :色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.2％ 十二烷基磺酸钠溶液-乙腈(50:50,含0.1％ 三乙胺),用磷酸调至pH 3.8,检测波长210 nm,流速0.6 ml/min,柱温30℃,进样体积10μl.结果 :盐酸米那普仑在0.65～2.59μg/ml范围内线性关系良好,相关系数r=0.9995,平均回收率为76.83％,RSD=5.23％(n=18).结论 :该方法操作简便、快速,结果准确,可用于清洁验证残留物盐酸米那普仑的定量分析.

目的：建立清洁验证中残留物阿哌沙班含量测定的高效液相色谱法。方法：色谱柱为Waters Nova-Pak C18（3.9 mm×150 mm，5μm），流动相为乙腈-水（30∶70），检测波长280 nm，流速1.0 ml/min，柱温30℃，进样量10μl。结果：阿哌沙班在0.01～20μg/ml范围内线性关系良好，r2=0.9992；回收率为75.90%，RSD=2.33%（n=18）。结论：该方法操作简便、结果准确，可以用于清洁验证残留物阿哌沙班的定量分析。

药品生产结束后,必须采取有效的清洁剂和清洁方法将制药设备中的残留物和微生物清除,而清洁验证是检验清洁措施是否有效的重要手段,也是我国GMP(1998年版)规定执行的内容.

详细介绍了磺胺二甲嘧啶原料药生产设备的清洁验证情况,以供读者参考.

中药制剂成分复杂、不明确,有关成分含量难以测定,这些特殊性使中药制剂的GMP清洁验证在清洁规程的优化、可接受标准的确定、检验方法的选择、清洁有效期确定以及再验证等方面和化学药物具有很多的特点和难点,本文就此进行探讨,为中药制剂生产企业在GMP清洁验证工作提供操作性强的方法和思路.

本文以苯巴比妥作为残留物为例说明清洁验证中残留物检测分析方法的验证.

建立了流动注射化学发光法测定清洁验证过程中二氢吡啶类药物(尼群地平、尼莫地平、非洛地平和间尼索地平)残留量.上述二氢吡啶类药物在0.2～4 μ,g/ml范围内线性关系良好,最低检测限为0.03～0.06 μg/ml.平均回收率为96.3％～100.9％,RSD＜3.6％.

为验证清洁操作完成后生产设备表面盐酸贝那普利的残留量是否低于安全指标,建立了高效液相色谱法测定擦拭棉签的提取溶液中盐酸贝那普利的含量.使用DiamonsilC18色谱柱,流动相为溴化四丁铵溶液(取溴化四丁铵2.25 g,加入含有0.56 ml冰乙酸的1L水中):甲醇(32:68),检测波长240 nm.盐酸贝那普利在0.14～2.80 μg/ml浓度范围内线性关系良好.擦拭回收率为87.97％,RSD为2.55％.加样回收率为103.0％,RSD为1.82％.