目的应用丙酮酸氧化酶微板法、紫外-乳酸脱氢酶微板法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT),探索适用于中小型血站及医院中心血库筛查献血者ALT的方法,以降低院内输血感染疾病的风险.方法选取体检和化验合格的381例健康献血者血标本及89例ALT异常的献血者血标本,应用全自动生化分析仪、丙酮酸氧化酶微板法、紫外-乳酸脱氢酶微板法分别测定上述标本ALT浓度.结果丙酮酸氧化酶微板法、紫外-乳酸脱氢酶微板法检测381例血清标本ALT浓度,与全自动生化分析仪结果的相关系数分别为r1＝0.9935,r2＝0.9862,使用3种方法检测381例血清标本ALT浓度为9.3～192 IU/L,3种方法检测结果之间差异无显著性(P＞0.05);3种方法测定89例ALT异常的献血者标本,异常结果差异无显著性;紫外-乳酸脱氢酶和丙酮酸氧化酶微板法的板内变异分别为3.32%、3.54%,板间变异分别为4.89%、5.48%.结论丙酮酸氧化酶微板法、紫外-乳酸脱氢酶微板法可有效替代全自动生化分析仪测定ALT,减少因输血造成的医院感染.

血浆游离血红蛋白(Hb)是诊断血管内溶血的一个重要项目,目前血浆游离Hb测定多用邻-甲联苯胺法[1],试剂有致突变性、刺激性和不稳定性.我们用酶联免疫吸附试验(ELISA)广泛采用的显色剂TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺),建立了定量测定血浆游离Hb的微板速率法.

血液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定目前仍是采供血机构筛选献血者的项目之一.在肝炎早期,检测 ALT有一定的实际意义.本中心引进全自动加样系统,采用微板速率法测定ALT,快速准确,避免了手工操作的误差.加样品后间隔不同时间进行检测,现将结果报告如下.

ALT活性检测是献血者初筛和血液复检的常规检测项目,目前已经有许多大中型血站采用微板速率法取代了赖氏法测定ALT活性,笔者对这两种方法进行比较分析,现报告如下.

丙氨酸氨基转移酶(ALT)作为肝功能检测的指标之一,除在肝炎的诊断及防治方面具有重要临床价值外,在血站系统对献血者的筛查也是一项重要指标,自1998年10月1日<中华人民共和国献血法>实施以后,卫生部在对献血者健康体检新标准中仍将其列为检测项目之一.ALT检测的方法主要有以下两类,一类是比色法,另一类是连续检测法(速率法).速率法准确度较高,分为单试剂法(一步法)和双试剂法(二步法),全文主要讨论一步法,通过对深圳市血液中心采用微板速率法测定ALT值的结果分析,探讨延迟时间的合理设置.

目的：探讨全自动酶联免疫分析系统微板速率法检测丙氨酸氨基转移酶（ALT ）的方法评价和临床应用。方法参照国际临床化学联合会（IFCC ）的推荐方法，结合分析系统建立微板速率法，通过方法学试验，评价其线性、批内和批间重复性；比较823例体检者血清标本采用微板速率法与常规生化分析仪法检测A L T的结果，并评价方法的临床应用。结果微板速率法检测ALT ，在活性303 U／L以下具有良好的线性；批内和批间变异系数均小于1／5TEa ，其检测结果与常规生化分析仪的相关性良好。结论全自动酶联免疫分析系统微板速率法检测ALT ，为大批量标本同时检测 ALT和ELISA项目提供了很好的选择，值得临床推广使用。

采供血机构实行血液集中化检测,是优化血站资源配置、保证输血安全的必然措施[1,2],随着全自动加样系统在血站的应用,以前ALT的测定多采用微板速率法,但它在试验温度、反映时间,读板条件等方面所规定的实验检测状态受到手工操作的限制.

采供血机构ALT检测方法不尽相同,选择一个既准确又适合要求的检测方法很有必要.笔者运用生化分析仪(速率法)检测ALT,比较了生化分析仪速率法与微板速率法,介绍如下.

目的 优化微板速率法检测ALT的参数.方法 采用动力学法,利用全自动加样器,结合微板、酶标仪以及局域网实现自动化检测.结果 微板速率法检测ALT 的标本量为50μl,基质液为200μl;RSP分配样品离孔底3mm距离同时以240μl /s速度分配, RSP吸液和分配基质液速度依次为100、220μl /s,附加体积为70μl;基质液预热温度为33℃±1℃,酶标仪测定温度设定30℃,室温控制在25℃±3℃;检测主波长340nm,参比波长无;延迟时间为120s,测定时间120-360s,每隔60s读1次板;校正因数为2 100;初始吸光度值下限OD值为0.700;中值血清加液时差前后ALT相差3U/L,批内和批间变异系数依次为1.77%、3.24%,卫生部临检中心PT得分100%.结论 优化参数后,实现ALT速率法自动化检测,而且加样加液不产生气泡,同时降低了加样时差、边缘效应对结果的影响以及测定温度较易控制等优点.