Bcl-2、Bax是调控细胞凋亡的结构相似、作用相反的一对胞内蛋白质,二者的比例是决定对细胞抑制作用强弱的关键因素.Bcl-2/Bax与镉性肾细胞凋亡的发生、发展及转归密切相关.本文综述了Bcl-2、Bax调节细胞凋亡机制及在镉致肾细胞凋亡领域的研究进展.

目的 探讨孕期不同剂量苯并(a)芘暴露对仔鼠肝脏凋亡相关蛋白Bcl -xl和Bax表达水平的影响.方法 将雌雄大鼠合笼后雌性SD大鼠见阴栓确定为受孕,以检出日为孕期第0d.将孕鼠随机分为4组,每组8只,分为对照组(玉米油)和苯并(a)芘处理组(0.75 mg/kg、1.5 mg/kg和3 mg/kg).从妊娠第3d开始经灌胃苯并(a)芘直到妊娠第17 d结束,分别在孕0、4、7、14、19 d称孕鼠体重.待其自然分娩后24 h内测量仔鼠的体重、身长及尾长,然后取仔鼠肝脏,采用Western blot方法检测仔鼠肝脏中Bcl - xl和Bax蛋白的表达水平.结果 随着孕期苯并(a)芘暴露水平的增加,新生仔鼠体重、身长、尾长等生长发育指标均有一定程度的下降,但未达到显著性差异(P＞0.05).Western blot结果显示,与对照组相比,中、高剂量染毒组仔鼠肝脏的Bcl - xl蛋白表达均明显下降,Bax蛋白表达均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 本研究建立了一种低水平的苯并(a)芘暴露模型,随着孕期苯并(a)芘染毒剂量的增加,新生仔鼠肝脏的凋亡相关蛋白Bcl - xl/Bax比值下降,提示细胞凋亡可能是参与孕期苯并(a)芘暴露导致新生仔鼠肝脏毒性作用的机制之一.

目的 观察切除颌下腺对大鼠睾丸Bax和Bc1 2 mRNA表达的影响.方法 切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测Bax和Bc1 2 mRNA的改变.结果 随着颌下腺切除时间的延长,实验组大鼠睾丸Bax和Bc1 2 mRNA的比值显著升高,与对照组比较,有显著性差异(P<0.01).结论 颌下腺切除大鼠睾丸Bax和Bc1 2 mRNA比值明显升高,提示颌下腺切除所致的大鼠睾丸生精细胞的凋亡可能是由Bax和Be1 2介导的线粒体途径进行,但Fas/FasL是否参与该凋亡过程还有待进一步研究.

目的 探讨雷公藤多甙对大鼠精子发生的抑制作用及其可能的信号通路. 方法 成年雄性大鼠给予雷公藤多甙(16 mg/kg)灌胃,每日1次,在2及6周检测血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和可的松水平;光镜观察睾丸组织的形态学变化;原位末端标记法(TUNEL)观察睾丸生精细胞凋亡;免疫组织化学法观察凋亡通路相关蛋白Bax/Bcl-2的表达. 结果 给药组与对照组相比,性激素、肾上腺皮质激素均无显著变化(P均>0.05);给药2周后精子数下降和畸形率上升(P<0.05),给药4和6周精子数下降和畸形率升高更显著(P<0.001);组织学检查给药组大鼠生精小管内各级精母细胞和精子细胞数明显减少,生精细胞排列紊乱,原始精原细胞和支持细胞(Sertoli细胞)未见明显改变.与正常对照组相比,生精小管内生精细胞凋亡显著增加(2周P<0.05,4和6周P<0.001).凋亡相关蛋白Bax表达明显上调,Bcl-2表达无显著差异. 结论 雷公藤对大鼠精子发生的抑制作用表现为增加生精细胞凋亡,导致精子计数下降,精子的畸形率升高.雷公藤多甙使睾丸Bax表达增加,与诱导生精细胞凋亡相关,可能是相关的信号通路之一.进一步研究雷公藤多甙作用的分子信号机制有助于今后降低剂量、减少毒副作用,探讨其作为一种安全的男性避孕药可能性.

目的 研究明日叶查尔酮(Ashitaba Chalcone,AC)对2型糖尿病大鼠胰腺细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 将用高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素腹腔注射诱发的2型糖尿病雄性大鼠随机分为4个组,高、中、低剂量AC组高脂饲料喂养的基础上分别每日经口灌胃给予AC 30、10和5 mg/kg,糖尿病对照组只喂饲高脂饲料,正常对照组喂养普通饲料,实验期4周.用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖含量,放射免疫法测定血清胰岛素含量,免疫组化法检测胰腺细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测胰腺细胞的增殖活性.结果 糖尿病对照组Bcl-2和Bax表达水平分别为(0.407 ±0.032)和(0.615 ±0.050),高剂量AC组则为(0.488±0.020)和(0.544±0.026),差异均有统计学意义(P＜0.05)；糖尿病对照组胰腺细胞增殖活性为(0.244±0.023),高剂量AC组较其明显升高(P＜0.05).结论 AC可上调胰腺细胞Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,对2型糖尿病大鼠胰腺细胞损伤具有一定的拮抗作用.

目的 探讨冬凌草甲素(Oridonin)对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 采用MTT法观察不同浓度冬凌草甲素对A549细胞增殖的抑制作用;瑞氏-吉姆萨染色法检测细胞形态学的改变;Western blot法观察Bcl-2和Bax表达水平的变化.结果 冬凌草甲素明显抑制A549细胞的增殖,作用24、48和72 h的IC50分别是87.9、67.6和45.2 μmol/L,姬姆萨染色可观察到核染色质浓缩、胞浆空泡、核裂解等典型的凋亡细胞形态学改变,Western blot分析显示有Bcl-2表达的降低和Bax表达的上调.结论 冬凌草甲素对人A549细胞具有生长抑制和诱导凋亡作用,同时抗凋亡蛋白Bcl-2表达的降低和促凋亡蛋白Bax上调可能是冬凌草甲素诱导肺腺癌A549细胞发生凋亡的重要作用机制之一.

目的 初步探讨大鼠大脑皮层细胞凋亡在2,5-己二酮(HD)致大鼠神经退行性病变中的作用.方法 60只Wistar雄性大鼠,经腹腔染毒,剂量分别为100和300 mg/(kg·d),连续8周(每周5d).处死一半动物并分离、冻存大脑组织.另一半动物停止染毒、自然恢复8周后取材.采用TUNEL方法检测大鼠大脑皮层细胞凋亡指数(AI),采用免疫组化方法检测大鼠大脑皮层细胞Bcl-2和Bax的相对含量.结果 染毒8周后,100和300 mg/kg剂量组动物AI分别为22.25％ (P ＜0.05)和25.12％ (P ＜0.05),与对照组7.94％比较,阳性细胞数量明显增加.恢复8周后100和300 mg/kg剂量组动物AI分别为18.45％ (P ＜0.05)和17.20％ (P ＜0.05),与对照组7.48％比较,仍存在显著性差异,但300 mg/kg剂量组动物AI较染毒8周时有所减小;100和300 mg/kg剂量组动物在HD染毒8周和8周+恢复8周时,Bcl-2含量分别相当于对照组的89.2％、78.4％和80.9％、132.9％;Bax含量分别相当于对照组的126.3％、135.6％和74.6％、80.9％.结论 HD致大鼠退行性病变过程中可能伴有大脑皮层细胞凋亡的发生.

目的 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)对GC-2spd细胞Bcl-2、BaxmRNA表达的影响.方法 体外培养GC-2spd细胞,用不同浓度的DEHP(0、50、100和200 μmol/L)染毒24h.采用MTT实验检测细胞存活率,AnnexinV-FITC/PI双染色法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光定量PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达.结果 在DEHP染毒细胞24h后,随着DEHP浓度(0、50、100和200 μmol/L)的增加,细胞存活率逐渐下降,细胞凋亡率逐渐上升,Bcl-2 mRNA表达水平下降,Bax mRNA表达水平上升.结论 DEHP可能通过线粒体通路诱导GC-2spd细胞凋亡,进而影响雄性生殖功能.

目的 研究醋酸铅能否诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡,并探讨其凋亡机制.方法 平板克隆实验法检测细胞活力;Annexin V(膜联蛋白V)-FITC(异硫氰酸荧光素)/PI(碘化丙啶)双染法结合流式细胞仪分析细胞凋亡率;荧光化学分光仪分析caspase-3、-8.-9(半胱天冬酶-3、-8、-9)的活性变化;Western bolt(免疫印迹法)检测bcl-2、bax蛋白的表达.结果 铅可抑制HK-2细胞生长活力,随着铅浓度增高,细胞生长活力降低(P＜0.05,P＜0.01);铅使caspase-3、caspase-9的活性增强(P＜0.05,P＜0.01),但对caspase-8的活性无明显影响;caspase-3抑制剂可明显抑制铅诱导的caspase-3的活化,并抑制铅诱导的HK-2细胞凋亡;Western bolt结果显示铅染毒组HK-2细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白表达降低,bax蛋白表达增高.结论 铅诱导HK-2细胞凋亡可能与铅增强caspase-3活性及抑制bcl-2蛋白表达有关.

目的 研究不同剂量氯化镧( lanthanum chloride,LaCl3)对大鼠原代星形胶质细胞凋亡以及促凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bcl-2表达的影响.方法 原代培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞经0、0.125、0.25、0.5和1.0 mmol/LLaCl3处理12和24h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测细胞Bax和Bcl-2 mRNA表达水平.结果 0.25、0.5和1.0 mmol/L LaCl3染毒12、24h均显著降低大鼠原代星形胶质细胞存活率,显著增加大鼠原代星形胶质细胞凋亡率,具有一定的剂量-反应关系.0.25、0.5和1.0 mmol/LLaCl3染毒12、24 h组大鼠原代星形胶质细胞的Bax mRNA表达水平显著高于对照组,且随染毒剂量增加而增加.此外,0.25 mmol/L LaCl3染毒24h和0.5、1.0 mmol/L LaCl3染毒12、24h组大鼠原代星形胶质细胞的Bcl-2 mRNA表达水平显著低于对照组,且随染毒剂量增加而下降.结论 LaCl3对大鼠原代星形胶质细胞的毒性作用可能与促凋亡基因Bax表达升高、抑凋亡基因Bcl-2表达下降而致凋亡过度有关.

目的 研究二乙氧基乙醇(2-Ethoxyethanol,2-EE)对大鼠睾丸生精细胞中Bax,细胞色素C(Cytochrome C,Cyt C)以及Caspase-3表达的影响,探讨其在生精细胞凋亡调控中的作用.方法 选择Wistar大鼠,分别给予剂量400、800和1 200 mg/kg的2-EE,连续灌胃7 d,对照组以等量生理盐水灌胃,分别于末次染毒后第1和29天处死动物.采用免疫组化法(SP法),观察不同剂量染毒后及自然恢复4周后生精细胞中Bax,Cyt C以及Caspase-3的表达情况.结果 400、800和1 200 mg/kg染毒7 d后,大鼠睾丸生精细胞中Bax,Cyt C以及Caspase-3的表达水平不同程度的上升,尤其以800 mg/kg组最为明显.自然恢复4周后,生精细胞中Bax,Cyt C以及Caspase-3的表达基本接近对照组水平.结论 在本试验条件下,2-EE急性染毒可能通过影响大鼠睾丸生精细胞中Bax,Cyt C和Caspase-3的释放,调控生精细胞凋亡,与2-EE所致睾丸毒性的可恢复性高度相关.

目的 研究硝酸钇对小鼠胚胎干细胞神经发育的影响及可能作用机制.方法 建立以胰岛素-转铁蛋白-硒-纤维连接蛋白(ITSFn)培养法为基础的胚胎干细胞神经发育毒性评价模型,通过MTT试验、彗星试验、流式细胞试验、RT-PCR和免疫印迹试验,检测不同浓度硝酸钇溶液对胚胎干细胞神经发育的影响.结果 彗星试验和流式细胞仪检测结果显示,低剂量硝酸钇降低了神经元细胞凋亡率,而高剂量组神经元细胞凋亡率上升,各剂量组细胞凋亡率随着浓度增加呈现先降后升的趋势.RT-PCR和免疫印迹结果表明,低剂量硝酸钇可上调抗凋亡基因Bcl-2的表达,高剂量组则上调Bax的表达,抑制Bcl-2的表达.结论 硝酸钇可通过调节凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达影响小鼠胚胎干细胞的神经发育,但这种影响因剂量高低而具有两面性.

目的 研究二十二碳六烯酸(DHA)复合物的抗癌机制.方法 以体外细胞培养的方法评价DHA复合物对U251胶质瘤细胞的抑制作用;以RT-PCR方法研究DHA复合物对U251胶质瘤细胞中Bcl-2和Bax mRNA含量的影响.结果 DHA复合物U251神经胶质瘤细胞的IC_(50)为0.3746μg/ml(0.3324～0.4168 μg/ml);与阴性对照组比较,DHA复合物使U251胶质瘤细胞内Bcl-2 mRNA含量明显降低(P<0.01);Bax mRNA含量明显升高(P<0.01).结论 在本试验条件下,DHA复合物在体外对U251神经胶质瘤细胞有抑制作用,其机制可能为降低Bcl-2基因转录,增加Bax基因转录,从而通过促进细胞凋亡达到抗癌目的 .

目的 探讨硫酸镍诱导大鼠睾丸生精细胞凋亡的类型及其对生精细胞Bcl-2、Bax蛋白表达和雌二醇水平的影响.方法 健康性成熟Wistar雄性大鼠32只,随机分为4组,正常对照组,硫酸镍1.25、2.5、5.0 mg/kg 3个剂量组.腹腔注射染毒,1次/d,连续30 d.采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡;免疫组化SABC法检测生精细胞Bcl-2和Bax蛋白表达;放射免疫法检测血清雌二醇(E2)水平.结果 与对照组比较,各剂量组大鼠睾丸生精细胞凋亡增多(P＜0.05),且凋亡细胞主要是生精早期和晚期阶段的精原细胞和精母细胞.各剂量组大鼠生精细胞Bcl-2阳性表达减少而Bax阳性表达增多,且血清E2水平降低(P＜0.05).结论 硫酸镍可诱导大鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡,其机制可能与生精细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调以及雌二醇水平降低有关.

目的 观察氟化钠对体外培养小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响,以及对睾丸间质细胞中Bcl-2和Bax表达的改变.方法 体外培养的小鼠睾丸间质细胞,将细胞分4组,加入不同浓度的氟化钠(0、5、10和20 mg/L),染毒0、24、48、72、96和120 h后采用MTT法检测各组细胞的增殖,并用免疫组织化学法检测氟化钠对小鼠睾丸间质细胞Bcl-2和Bax的表达.结果 氟化钠作用24和48 h后,20 mg/L氟化钠对睾丸间质细胞增殖率有明显抑制作用,而5和10 mg/L组没有明显影响;10 mg/L氟作用72 h后,明显抑制睾丸间质细胞的增殖;各浓度氟作用96和120 h后均表现明显抑制作用.与对照组比较,染氟组睾丸间质细胞凋亡显著增加(P＜0.01),Bax表达增加(P＜0.01),而Bcl-2表达减少(P＜0.01).结论 氟化钠对小鼠睾丸间质细胞的增殖有抑制作用,并诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡.氟化钠影响体外培养小鼠间质细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达,证实了氟化钠对小鼠间质细胞的发育有毒性作用.

目的 了解新生期注射己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对雌性BALB/c小鼠生后不同时期脾细胞凋亡及Bcl-2、Bax的影响.方法 新生雌性BALB/c小鼠,在生后24h内颈背部皮下注射 DES 40 μg,每隔24h注射一次,共连续5次.对照组平行注射等量无菌豆油.分别在生后7、14、21、35和49 d将小鼠处死,取其脾进行常规石蜡包埋和切片,进行TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling,)检测以及Bcl-2、Bax的免疫组织化学检测.结果 与对照组相比,DES组雌性BALB/c小鼠脾细胞的TUNEL阳性细胞数目在生后各点均有显著性增加.Bcl-2在各时间点DES组的表达均弱于相应的对照组.Bax在生后7d的对照组和DES组中的表达差异无统计学意义,而在生后14、21、35和49d DES组的阳性表达明显多于对照组.结论 新生期注射 DES 可以导致雌性BALB/c小鼠脾细胞凋亡明显增加.细胞凋亡在对照组和DES组不同时间点的动态变化以及在两组间相同时间点的差异可能与Bcl-2表达的减少以及Bax表达的增加有关.

目的探讨铝引起大鼠海马神经细胞凋亡与bcl-2、bax mRNA表达变化的关系.方法健康雄性SD大鼠40只,按体重随机分为4组:生理盐水组、Al3+2.5、5.0、10.0mg/kg组.染毒60天后处死,用TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR法检测bcl-2、bax mRNA的表达,用凝胶成像系统进行结果分析.结果与对照组相比,Al3+ 5.0mg/kg、10.0mg/kg组大鼠海马神经细胞凋亡率显著升高 (P<0 05),而Al3+2.5mg/kg组与对照组相比凋亡率升高,但差异无显著性;3个染毒组bcl-2 mRNA表达均显著下降(P<0.05);3个染毒组bax mRNA表达显著升高(P<0.05);海马神经细胞凋亡指数与bcl-2 mRNA表达呈负相关(r=-0.909,P<0.01),与bax mRNA表达呈正相关(r=0.871,P<0.01).结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡,其机制与bcl-2 mRNA表达下调,bax mRNA表达上调有关.

目的 应用RNA干扰技术降低促凋亡基因bax的表达,以阻抑铝诱导的神经胶质瘤细胞凋亡.方法 设计了3对阻抑bax基因表达的siRNA序列,对神经胶质瘤细胞进行了转染,根据不同siRNA序列在不同转染剂量、不同转染时间的细胞活力,找到bax siRNA转染的最佳转染剂量和最适转染时间.依据RNA干扰前后bax基因的表达变化筛检出最有效的siRNA序列.用荧光染色法、荧光定量PCR法和免疫组织化学染色法分别检测其转染效率、对基因表达的干扰效率及对蛋白表达的阻抑效应.结果 最有效的针对bax基因的siRNA序列为siRNA1,该序列的转染效率90%,时bax基因表达的干扰效率为62.3%.最佳转染后检测点为转染后72h,最适转染剂量为20nmo/L.结论 阻抑bax基因表达的siRNA序列能有效干扰bax基因和蛋白的表达,降低凋亡率.

目的 探讨丙烯腈(AN)暴露对小鼠睾丸生精细胞Bcl-2、Bax蛋白表达水平的影响.方法 将250只成年健康SPF级昆明种雄性小鼠,按体重随机分为阴性对照组、3个AN染毒组和阳性对照组,阴性对照组用生理盐水,各染毒组分别以1.25、2.50、5.00mg/kg AN腹腔注射(注射剂量为0.01 ml/g BW),每天1次,连续5天,阳性对照组注射环磷酰胺40mg/kg一次.分别于首日染毒后的第7、14、21、28和35天采用颈椎脱臼法处死小鼠,采用免疫组织化学法(SABC)检测生精细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 5个观察时间点AN 2.50mg/kg组和21天AN 1.25mg/kg组Bcl-2平均光密度值均显著低于阴性对照组(P＜0.05);除21天AN 1.25mg/kg组外,所有观察时间点AN各染毒组Bax平均光密度值均显著高于阴性对照组(P＜0.05).Bcl-2在中剂量组和阳性对照组各观察时间点降低幅度均较大;Bax在各剂量组的不同时间点均以14天时升高幅度最大.结论 AN可诱导生精细胞Bcl-2蛋白表达减弱,以AN 2.50mg/kg组最为显著;同时可诱导生精细胞Bax蛋白表达增强,以14天时变化幅度较明显.

目的 比较不同有氧运动时间对小鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制.方法 80只2月龄雄性清洁级BALB/c小鼠随机分为短期静止组、长期静止组、短期运动组和长期运动组各20只.短期静止组和短期运动组小鼠饲养和有氧训练3个月,长期静止组和长期运动组小鼠饲养和有氧训练6个月.分别采用TUNE法、RTPCR法和蛋白印迹法测定心肌细胞凋亡情况以及Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达.结果 长期运动组小鼠心肌细胞凋亡指数较其他三组小鼠明显下降(P＜0.05),并且心肌Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平、Bcl-2/Bax比值较长期静止组及短期静止组小鼠显著上升(P＜0.05),而Bax mRNA及蛋白表达水平较长期静止组、短期静止组显著下降(P＜0.05).与短期运动组比较,长期运动组Bcl-2/Bax mRNA比值及蛋白比值得到明显改善(P＜0.05).短期运动组小鼠的心肌细胞凋亡指数以及心肌Bcl-2、Bax表达较短期静止组有所改善,但差异无统计学意义.结论 6个月有氧运动训练可有效阻止小鼠心肌细胞凋亡,改善心肌细胞Bcl-2、Bax表达和Bcl-2/Bax水平是其重要的作用途径.

在肿瘤发生和发展过程中,细胞不仅发生了异常增殖,更重要的是其发生凋亡的能力和倾向降低了.BCL2家族在细胞凋亡调控中有重要的作用,是目前细胞凋亡研究的热点之一.BCL2家族分为抑制凋亡和促进凋亡蛋白两大类.bcl2和bax分别是BCL2家族中最主要的抑制凋亡和促进凋亡蛋白.肿瘤的bc]2/bax表达比例与其发生和发展密切相关.本文将着重阐述BCL2与肿瘤发生的关系及其对肿瘤细胞凋亡的调控研究现状,以及BCL2在肿瘤诊断、治疗方面中的应用.

目的:探讨凋亡调节基因Bcl-2和Bax在子宫内膜异位症发生发展中的作用.方法:SP法检测子宫内膜异位症76例异位内膜、64例在位内膜和72例正常子宫内膜组织中Bcl-2和Bax的表达.结果:异位内膜组Bcl-2蛋白表达强于在位内膜和对照组,分泌期差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);异位内膜组Bax蛋白表达低于在位内膜组和对照组,增生期和分泌期,异位内膜组染色强度均低于在位内膜组和对照组,分泌期差异有统计学意义(P＜0.05);Bcl-2和Bax在对照组及在位内膜组均呈周期性变化,Bcl-2增生期强于分泌期,Bax分泌期强于增生期,异位内膜组失去周期性变化;增生期3组Bcl-2表达均强于Bax,在位内膜组、异位内膜组差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);而分泌期对照组和在位内膜组Bax强于Bcl-2,异位内膜组Bax表达较Bcl-2弱,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:Bcl-2和Bax在子宫内膜异位症发生发展中发挥重要作用.

目的建立一种新的兔脑出血动物模型,研究在脑出血后血肿周围脑组织细胞凋亡和bc1-2、bax蛋白的表达.方法采用二次注血法,将0.5ml自体动脉血分次注入兔右额叶脑深层白质制作脑出血动物模型,利用CT观察其血肿形态.家兔40只,分为A、B、C、D 4组,A组为对照组,同一部位注射等量生理盐水,实验组动物分别于模型制作完成后12,24和72h断头处死.运用TUNEL法和免疫组织化学SP技术,检测出血灶周围脑组织细胞凋亡和bcl-2、bax蛋白的表达.结果二次注血法能有效的避免自体血从针孔溢出或破入脑室,血肿体积及形态相对一致,其中10例经CT检查证实.与对照组相比,实验组TUNEL阳性细胞数、Bcl-2和bax蛋白表达在各组间有显著性差异(P>0.05).Bcl-2蛋白表达与细胞凋亡数呈负相关(r=-0781),bax蛋白表达与细胞凋亡数呈正相关(r=0.723).结论出血灶周围脑组织存在细胞凋亡,细胞凋亡数的变化在一定程度上反映了周围脑组织的损伤程度.Bcl-2和bax蛋白对凋亡具有调控作用.

目的 探讨β-胡萝卜素抑制人膀胱癌T24细胞的分子生物学机制.方法 不同浓度的β-胡萝卜素作用于T244细胞,利用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测其凋亡指数,半定量RT-PCR检测Cx43、Bcl-2、Bax mRNA的变化,Western blot检测Cx43、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 10和20 μmol/L组β-胡萝卜素均能明显抑制T24细胞的生长和诱导细胞凋亡,其抑制率分别为28.83%、63.02%,并且呈明显的剂量-效应关系(P＜0.05),凋亡率分别为0.126±0.022和0.190±0.024(P≤0.01),随β-胡萝卜素浓度增加,细胞凋亡率增大,呈剂量依赖性关系(P=0.002).与对照组相比,10和20μmol/L组β-胡萝卜素上调Cx43 mRNA及其蛋白的表达,增强细胞间的细胞间隙连接通讯(GJIC)功能(P＜0.05),并且呈剂量依赖关系(P≤0.01);下调Bcl-2mRNA及其蛋白的表达,并且呈剂量依赖关系(P≤0.01);Bax mRNA及其蛋白的表达有上调趋势,但与对照组比较,差异无显著性.结论 β-胡萝卜素(10,20μmol/L)能通过有效下调Bcl-2mRNA及其蛋白在T24细胞的表达,上调T24细胞Cx43转录水平的表达、增强细胞间隙连接所介导的GJIC功能,从而诱导膀胱肿瘤细胞凋亡,抑制其生长.

目的：探讨Beclin-1、Bcl-2、Bax在子宫内膜样腺癌中的表达及意义。方法：运用免疫组化S-P法检测80例子宫内膜样腺癌及40例正常子宫内膜组织制作成的组织芯片中Beclin-1、Bcl-2、Bax 3种基因蛋白的表达，并分析三者间的相关性，以及与临床病理特征之间的关系。结果：①Bax、Bcl-2在子宫内膜样腺癌中高表达，而Beclin-1在子宫内膜样腺癌中低表达，提示三者可能均参与了子宫内膜样腺癌的发生发展。②Beclin-1与Bcl-2、Beclin-1与Bax表达呈负相关，提示Bax、Bcl-2可能通过抑制Beclin-1的表达，共同促进子宫内膜样腺癌的发生发展。③Beclin-1与Bcl-2的表达与子宫内膜样腺癌的某些临床病理特征之间存在一定相关性。Beclin-1阳性表达与肿瘤分化程度及TNM分期密切相关，可望作为预后评估的参考指标。结论：Beclin-1、Bcl-2、Bax在子宫内膜样腺癌中有着不同的表达水平并具有重要的临床意义。

目的:探讨哇巴因凋亡诱导Jurkat细胞凋亡的机制.方法:四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察哇巴因对Jurkat细胞生长的抑制作用;应用流式细胞术、原位末端标记技术(TUNEL)等观察细胞凋亡;应用Western-blot测定Caspase-3的活性亚单位及Bcl-2、Bax蛋白表达水平;比色法检测Caspase-3活性.结果:哇巴因能诱导Jurkat细胞凋亡,细胞凋亡过程中,Bax蛋白表达增加,Caspase-3活性明显升高.结论:结论:哇巴因可能通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达从而激活Caspase途径诱导Jurkat细胞凋亡.

目的:探讨参附注射液对大鼠缺血再灌注小肠细胞Bax、Bcl-2及c-myc蛋白表达的影响及它们与肠细胞凋亡的内在联系.方法:健康SD大鼠36只随机分为三组,空白对照组(S组)、缺血再灌注+生理盐水组(IR组)、缺血再灌注+参附注射液组(SF组),每组12只.采用钳闭肠系膜前动脉制备小肠缺血再灌注模型.免疫组化检测Bax、Bcl-2及c-myc蛋白的表达,每组选24个视野分别测量光密度值(OD值).TUNEL法检测凋亡的小肠细胞并计算凋亡指数.结果:①IR组Bax OD值明显高于S组(P<0.01), SF组Bax OD值明显低于IR组(P<0.01),且低于S组(P<0.05);②IR组Bcl-2 OD值高于S组(P<0.05).SF组Bcl-2 OD值高于S组(P<0.01),且IR组与SF组比较有显著差异(P<0.01);③IR组c-myc OD值明显高于S组(P<0.01),且明显高于SF组(P<0.01).IR组细胞凋亡指数明显高于S组和SF组(P<0.01),而SF组高于S组(P<0.05).结论:参附注射液增加小肠组织Bcl-2蛋白的表达,降低Bax及c-myc蛋白的表达,抑制小肠细胞凋亡,保护缺血再灌注小肠.

目的 观察不同程度低血压对双侧颈动脉中度狭窄家兔海马CA1区Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响,结合其行为学表现探讨低血压对其脑组织的损伤作用.方法 选择健康雄性家兔24只,完全随机法分为6组,每组4只,除了K组(空白对照组)外,其余20只在成功建立双侧颈动脉中度狭窄模型24h后,将其随机分为D组(单纯狭窄组)、X1组(硝酸甘油1组)、X2组(硝酸甘油2组)和B1组(丙泊酚1组)、B2组(丙泊酚2组),X1、X2组和B1、B2组通过硝酸甘油、丙泊酚分别降低基础血压的10％～15％和15％～20％,使血压波动于基础血压的85％～90％和80％～85％之间,维持30 min后补足容量恢复基础血压,继续喂养48 h.72 h将所有家兔断头取脑,做免疫组织化学染色图片,并利用IPP6.0图像分析软件测定其海马CA1区Caspase-3、Bcl-2、Bax的积分光密度值(I0D值).各组家兔于T1(建立模型前,0h)、T2(建立模型后24h开始降压前,24 h)及T3(恢复基础血压后48h开始断头前,72h),通过精神状态、反应程度、四肢肌力及饮水摄食情况等方面观察其行为学表现.结果 通过IOD值测量可得:与K组相比,D、X1、B1、X2、B2组阳性表达差异均有统计学意义(P＜0.05);与D组相比,X1、B1、X2、B2组阳性表达差异有统计学意义(P＜0.05);与X1组相比,D1组阳性表达差异无统计学意义,X2、B2组阳性表达差异有统计学意义(P＜0.05);与B1组相比,X2、B2组阳性表达差异有统计学意义(P＜0.05);与X2组相比,B2组阳性表达差异有统计学意义(P＜0.05).各组家兔在T1、T2行为学改变不明显;T3时,K组家兔行为学观察同T1时,D组家兔精神恢复正常,X1、B1组家兔则出现精神稍显萎靡、反应稍显迟钝、四肢肌力减退、活动减少、饮水、摄食活动下降,B2组家兔出现精神萎靡、饮水、摄食减少等表现,而X2组家兔甚至出现嗜睡、进食、饮水很少等表现.结论 降低双侧颈动脉中度狭窄家兔基础血压10％～20％导致Caspase-3、Bax阳性表达增高、Bcl-2阳性表达减少,结合其行为学表现说明其出现早期脑损伤.其中降低基础血压15％～20％两组中,丙泊酚对脑组织损伤较轻,可能与其脑保护作用有关.

目的 观察大蒜油和白藜芦醇联合用药对人胃癌MGC-803细胞凋亡及对Fas抗原表达、bcl-2基因、bax基因mRNA表达的影响.方法 实验设大蒜油和白藜芦醇联合用药组1(各25μg/ml)、联合用药组2(各50 μg/ml)和空白对照组,应用DNA梯度电泳及流式细胞术检测药物作用24 h后细胞凋亡情况及Fas抗原表达情况;应用RT-PCR方法检测用药24 h和48 h后胃癌细胞bcl-2、bax基因mRNA表达水平.结果 DNA梯度电泳可见联合用药组出现明显的"Ladder"带;流式细胞术显示各用药组annexin v阳性细胞数比对照组明显增多;联合用药组1和联合用药组2细胞Fas抗原表达阳性率分别为10.59%和14.16%,比对照组(5.27%)明显增高并有显著的统计学意义;各联合用药组Bcl-2基因mRN&表达水平比对照组下降而Bax基因mRNA表达升高.结论 大蒜油和白藜芦醇联合用药诱导胃癌细胞凋亡可能与其促进胃癌细胞Fas抗原Bax基因表达增加并抑制bcl-2基因的表达有关.

目的 探讨微囊藻毒素MC-LR促肝癌过程对Bcl-2和Bax表达的影响.方法 采用二阶段致癌理论建立中期试验动物模型,GGT染色检验MC-LR的促癌作用,并以免疫组化法、RTPCR结合图像分析技术精确测定大鼠肝脏Bcl-2和Bax的蛋白与mRNA表达情况.结果 MC-LR在促大鼠肝癌过程中能显著增加γ-谷氨酰转肽酶(GGT)阳性率,GGT染色的阳性率DEN+纯毒素组为100%显著高于二乙基亚硝胺(DEN)对照组22.22%.MC-LR在促大鼠肝癌过程中能显著增加大鼠肝脏BCL-2蛋白表达强度和面积,Bcl-2表达的强度和面积DEN+纯毒素组分别为0.0977和0.0315,显著高于强度和面积分别为0.0460和0.0205的DEN对照组.同时显著降低大鼠肝脏Bax蛋白表达强度和面积,Bax蛋白表达的强度和面积DEN+纯毒素组分别为0.0283和0.0073,显著低于强度和面积分别为0.0655和0.0244的DEN对照组.MC-LR在促大鼠肝癌过程中能显著增加大鼠肝脏Bcl-2mRNA表达强度,DEN+纯毒素组表达强度为2.244,显著高于其他各组.Bax mRNA表达强度DEN+纯毒素组虽然比其他各组低,但差别无统计学意义.结论 调节与细胞凋亡相关的癌基因和抑癌基因表达可能是MC-LR促癌过程的重要机制之一.