目的 探讨β-胡萝卜素抑制人膀胱癌T24细胞的分子生物学机制.方法 不同浓度的β-胡萝卜素作用于T244细胞,利用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测其凋亡指数,半定量RT-PCR检测Cx43、Bcl-2、Bax mRNA的变化,Western blot检测Cx43、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 10和20 μmol/L组β-胡萝卜素均能明显抑制T24细胞的生长和诱导细胞凋亡,其抑制率分别为28.83%、63.02%,并且呈明显的剂量-效应关系(P＜0.05),凋亡率分别为0.126±0.022和0.190±0.024(P≤0.01),随β-胡萝卜素浓度增加,细胞凋亡率增大,呈剂量依赖性关系(P=0.002).与对照组相比,10和20μmol/L组β-胡萝卜素上调Cx43 mRNA及其蛋白的表达,增强细胞间的细胞间隙连接通讯(GJIC)功能(P＜0.05),并且呈剂量依赖关系(P≤0.01);下调Bcl-2mRNA及其蛋白的表达,并且呈剂量依赖关系(P≤0.01);Bax mRNA及其蛋白的表达有上调趋势,但与对照组比较,差异无显著性.结论 β-胡萝卜素(10,20μmol/L)能通过有效下调Bcl-2mRNA及其蛋白在T24细胞的表达,上调T24细胞Cx43转录水平的表达、增强细胞间隙连接所介导的GJIC功能,从而诱导膀胱肿瘤细胞凋亡,抑制其生长.

目的 探讨慢性浅表性胃炎部分中医证型与Hp感染、胃黏膜细胞凋亡基因表达的相关性,从基因分子水平揭示慢性浅表性胃炎中医证候的实质,初步建立慢性浅表性胃炎证候分子水平的辨证指标体系.方法 电子胃镜下取胃黏膜组织,采用免疫组化方法 检测慢性浅表性胃炎不同证型胃窦黏膜组织Hp感染及凋亡基因Fas、bcl-2的表达情况,并设10名正常成人为对照组,进行多因素非条件logistic回归分析.结果 脾胃湿热组、肝胃不和组的Hp阳性率分别为52%、22%,与对照组比较均有显著性差异(分别为P＜0.01、＜0.05).脾胃湿热组、肝胃不和组的bel-2表达率分别为76%和24.2%,前者与对照组比较有显著性差异(P＜0.05).脾胃湿热组Fas表达率46%,与肝胃不和组(70.7%)、对照组(70%)比较有显著性差别(P＜0.05).肝胃不和组、脾胃湿热组的凋亡指数有显著性差异(P＜0.05).结论 与肝胃不和型相比,脾胃湿热型Hp、bel-2呈较高的表达率,Fas呈较低表达率.Hp、bcl-2表达率越高,诊断脾胃湿热型的可能性越大、诊断为肝胃不和型的可能性越小;Fas表达率越高,诊断脾胃湿热型的可能性越小、诊断肝胃不和型的可能性越大.Hp、bel-2和Fas对于慢性浅表性胃炎的辨证分型可能有价值.

目的:探讨鹿衔草挥发油诱导人软骨肉瘤细胞SW1353凋亡的作用机制.方法:MTT法检鹿衔草挥发油对人软骨肉瘤细胞SW1353增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-2,Bax基因的表达;Western Blot检测Bcl-2蛋白的表达.结果:鹿衔草挥发油在50 μ g/mL-150μg/mL浓度范围内能明显抑制SW1353细胞的增殖,并呈剂量和时间依赖性,IC50为106μg/mL;流式细胞仪检测的结果显示鹿衔草挥发油能诱SW1353细胞凋亡;RT-PCR结果表明Bcl-2基因表达降低,Bax基因表达增强;Western Blot结果表明Bcl-2蛋白表达降低.结论:鹿衔草挥发油通过诱导细胞凋亡抑制SW1353细胞增殖,可能与其下调Bcl-2表达,上调Bax表达有关.

通过观察白藜芦醇诱导人急性白血病细胞株KG-1凋亡的作用,检测bcl-2、caspase-3的表达,探讨白藜芦醇诱导白血病细胞凋亡的作用机制.采用噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长状态;瑞一吉染色、透射电镜观察KG-1细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡与周期分布;半定量RT-PCR检测bcl-2 mRNA、caspase-3 mRNA表达水平.结果显示白藜芦醇可明显抑制KG-1细胞增殖(P<0.01),与对照组相比,实验组使细胞发生S期阻滞(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01),使bcl-2的表达下调,上调caspase-3的表达(P<0.05).结论:白藜芦醇能诱导KG-1细胞凋亡,其机制可能与下调bcl-2、上调caspase-3表达水平有关.

目的 探讨创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马神经元Bcl-2和Bax的表达及与神经元凋亡的关系.方法 采用国际认定的SPS方法刺激大鼠建立PTSD大鼠模型,取SPS刺激后1d、4d、7d、14d组和正常对照组.应用透射电镜和原位末端标记法观察PTSD大鼠海马神经元细胞凋亡的形态学变化并检测细胞凋亡指数;应用免疫组织化学、免疫荧光双标、激光共焦显微镜技术和免疫印迹法检测Bel-2和Bax蛋白的表达. 结果 PTSD大鼠海马神经元出现细胞凋亡改变;凋亡细胞数量随时问的延长而逐渐增多,于SPS刺激后7d达高峰;Bel-2蛋白于SPS刺激后4d达高峰;Bax蛋白于SPS刺激后7d达高峰,之后逐渐下降.Bcl-2/Bax的比值于SPS刺激后一过性增加,以后随时间延长比值下降. 结论海马神经元细胞凋亡可能是PTSD大鼠海马萎缩的原因之一;Bel-2和Bax蛋白含量增加以及两者的比值失衡可能是导致PTSD大鼠海马神经元凋亡的原因之一.

目的:探讨丹皮酚(paeonol,Pae)单独及联合5-Fu对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用.方法:采用6种浓度的Pae(7.81、15.63、31.25、62.50、125.00、250.00 mg/L)、3种浓度的5-FU(12.50、25.00、50.00 mg/L)及Pae(31.25 mg/L)和5-FU(12.50 mg/L)联合分别处理EC9706细胞24、48、72 h.同时设对照组(细胞不做处理),采用MTT法检测各个时间段细胞的增殖情况:采用流式细胞术检测4种浓度的Pae(31-25、62.50、125.00、250.00 mg/L)处理EC9706细胞72 h后细胞周期的变化:倒置显微镜下观察各Pae组细胞各时间段形态学变化,HE染色光镜下观察凋亡细胞:采用免疫细胞化学法检测经Pae(31.25 mg/L)、5-FU(12.50mg/L)单独和联合作用48 h后细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达.结果:Pae、5-FU可明显抑制EC9706细胞增殖,并随着浓度的增加和作用时间的延长而增强(P<0.05),Pae与5-FU联合用药比单用Pae或5.FU抑制效果更明显(P<0.05);Pae作用后EC9706细胞中G0/G1期和G2/M期细胞比例下降、S期细胞比例上升(Pae 125.00 mg/L组:G0/G1期21.18%±2.28% vs 62.17%±5.23%、G2/M期0.76%±0.54% vs 9.92%±3.10%、S期78.06%±2.82% vs 27.91%±2.13%,均P<0.05):HE染色光镜下可见典型的肿瘤细胞凋亡改变:Pae、5-FU可下调EC9706细胞中Bcl-2蛋白表达,同时增强EC9706细胞中Bax蛋白的表达,联合用药组较单药组作用更为明显(2.21±0.14 vs 5.67±0.30,4.22±0.34;8.55±0.33 vs 3.90±0.27,6.28±0.26,均P<0.05).结论:Pae可明显抑制人食管癌EC9706细胞的增殖.促进其凋亡,Pae联合5-FU作用更为明显.

目的:初步探讨PUMA (P53 up-regulated modulator of apoptosis)蛋白在胰腺癌发生发展中的作用及其可能机制,并研究PUMA蛋白表达与临床病理学指标的关系.方法:应用免疫组化Envision方法检测60例导管胰腺癌组织石蜡标本中PuMA,Bcl-2和P53蛋白表达以及19例正常胰腺组织石蜡标本中PUMA蛋白表达;TUNEL检测细胞凋亡(AI);分析PUMA表达与临床病理学指标的关系以及其与AI和P53、Bcl.2表达的相关性.结果:PUMA在胰腺癌组织中的阳性率低于正常胰腺组织,有统计学差异(30% VS 57.9%,P＜0.05);PUMA表达与肿瘤大小,淋巴结转移和远处转移有关(P＜0.05),而与肿瘤分化程度和TNM分期无关:AI在PUMAFa性和阴性表达的肿瘤组织中,有统计学差异(20.63%±6.27%vs1 7.44%±5.86%,P＜0.05);P53和Bcl-2在胰腺癌中的表达率分别为46.7%(28/60)和41.7%(25/60);PUMA与P53和Bcl-2表达分别有显著的相关性P=0.013,P=0.046).结论:胰腺癌的生长、淋巴结和远处转移与PUMA蛋白表达缺失有关,PUMA可能是胰腺癌基因治疗的新粑点.

细胞凋亡是一种生理性细胞死亡机制,它是由基因控制的细胞自主的有序的死亡过程.细胞自噬是一种自我消化过程,通过包裹细胞内成分,再与溶酶体溶合,进而降解细胞成分.细胞自噬与凋亡之间存在复杂联系,在一定条件下自噬是细胞对应激适应性反应从而避免发生死亡,而在其他环境中,自噬是细胞死亡的替代途径.Bel-2家族成员在细胞凋亡与自噬过程中发挥着交叉性作用.本综述主要总结Bcl-2家族成员在细胞自噬中研究进展.

目的:观察补充葛根素对力竭性游泳训练造成的大鼠海马细胞凋亡以及Bel-2和P53表达的影响.方法:2月龄SD大鼠30只随机分为安静对照组、力竭训练组和力竭训练+葛根素补充组,每组10只.对照组不运动,其它两组进行4周的力竭性游泳训练.葛根素补充组每天给予葛根素注射液灌胃(100mg/kg),对照组及单纯力竭运动组给予等量生理盐水.各组大鼠分别于实验结束后麻醉处死,取大鼠海马组织,采用流式细胞仪检测大鼠海马组织细胞凋亡、Bcl-2及P53蛋白表达.结果:与安静对照组相比,力竭训练组海马细胞凋亡率显著升高(P<0.01),细胞增殖指数显著升高(P<0.05),海马神经细胞Bcl-2表达显著下降(P<0.05),P53表达显著升高(P<0.01).与力竭训练组相比,葛根素补充组海马神经细胞凋亡率显著下降(P<0.01).海马神经细胞Bcl-2表达显著升高(P<0.05),P53表达显著性下降(P<0.05).结论:补充葛根素对力竭性游泳大鼠海马细胞有保护作用及促进疲劳恢复的作用,可能与葛根素上调凋亡基因Bcl-2及下调P53蛋白表达有关.

目的 探讨凋亡抑制基因Survivin在子宫腺肌病的表达及其与Bcl-2、Bax的相关性.方法 应用免疫组织化学S-P法,检测46例子宫腺肌病异位及在位内膜组织中Survivin、Bcl-2、Bax蛋白的表达,并与正常在位子宫内膜组织30例进行对照.结果 子宫腺肌病异位内膜组织中Survivin蛋白阳性表达率为69.57%,明显高于正常在位内膜组织的表达率6.67%(P＜0.05),并且异位内膜组织中Survivin蛋白表达与月经周期无相关性(P＜0.05);Survivin蛋白表达与Bel-2蛋白呈正相关(P＜0.01),而与Bax蛋白呈负相关(P＜0.01).结论 Survivin可通过抑制异位内膜细胞凋亡,对子宫腺肌病的发生、发展起作用;Survivin与Bcl-2、Bax在子宫腺肌病的发生、发展中分别起协同和拮抗作用.

目的:通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Bel-2和Bax蛋白表达的影响,从细胞凋亡角度探讨该方干预胃癌前病变的作用机制.方法:将80只健康Wistar大鼠随机分为四组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃黏膜中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平.结果:善胃Ⅰ号方组Bcl-2蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物对照组(P<0.05)均降低,较正常对照组明显增高(P<0.05),善胃Ⅰ号方组Bax蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物对照组明显增高(P<0.05).结论:善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Bcl-2蛋白的表达并促进Bax蛋白的表达,从而促进胃癌前病变细胞凋亡对胃癌前病变的发展进行干预的.

目的:探讨三七苦碟子提取物(SK)对药物所致大鼠缺血心肌保护作用的机制.方法:60只健康雄性Wistar大鼠随机分成空白组、模型组、SK治疗组(灌服三七和苦碟子提取物自制剂)高、中、低剂量组、阳性对照组(灌服复方丹参滴丸)每组10只;采用异丙肾上腺素一次性多点皮下注射,复制大鼠心肌缺血动物模型.运用光镜、电镜,观察三七苦碟子提取物对缺血大鼠心肌损伤及细胞凋亡的影响,并运用免疫组化法观察作用对细胞凋亡相关基因Bel-2,Caspase-3蛋白表达的影响研究,探讨三七苦碟子提取物抗心肌缺血作用的机制.结果:不同剂量SK可不同程度地减轻心肌缺血损伤,对心肌细胞有保护作用.其中以SK高、中剂量组作用显著,其总体作用优于阳性对照组.结论:三七苦碟子提取物能有效抵杭大鼠急性心肌缺血.其作用机制可能与抑制心肌细胞凋亡,以及调节心肌Bcl-2、Caspase-3等凋亡相关蛋白表达密切相关,通过多种综合的作用机制起到保护心肌细胞、抗急性心肌缺血损伤的作用.

目的:探讨HCC组织中的核心蛋白、突变p53、Mdm2、Bcl-2的表达以及其相关性,探讨HCV核心蛋白是否有可能促进p53突变、Mdm2和Bel-2的表达.方法:收集手术切除HCC组织42例,采用免疫组织化学EnVision法检测HCC组织核心蛋白、突变p53、Mdm2、Bel-2的表达,用统计学方法及临床联系分析它们之间的关系.结果:C蛋白、p53、Mdm2和Bcl-2在HCC癌组织中的表达率分别为40.5%、47.6%、75.6%、83.3%;4组强度等级资料Kruskal.Wallis秩和检验H=19.01,差异性显著(p=0.000),Mann-Whimey U test:C蛋白和p53、Mdm2、Bcl-2蛋白问的P值分别0.43、0.009、0.00;C蛋白与突变p53、Bcl-2阳性强度两者间相关性检验P值分别为0.000、0.914,相关系数rs分别为0.67、0.08;突变p53与Mdm2、Bcl-2两者相关性检验P值为0.000、0.27,相关系数rp为0.72、0.32.结论:在HCV核心蛋白表达的HCC中核心蛋白可能促进野生型p53突变和表达;突变p53很可能促进Mdm2的表达;核心蛋白和突变p53都有可能促进Bcl-2蛋白的表达;HCV相关的HCC中这些蛋白的变化很可能促进肝细胞增殖或恶性生长.

目的:探讨姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制及凋亡相关基因表达的影响.方法:用姜黄素处理MG-63细胞,细胞计数法检测细胞增殖抑制的效果;荧光染色观察细胞的凋亡;流式细胞仪(FCM)进行细胞周期时相分析;免疫细胞化学法和western blotting免疫法检测细胞凋亡相关基因的表达水平.结果:随着姜黄素浓度的增加及其作用时间延长,对细胞的增殖抑制作用增强,最高抑制率可达89.07%;光镜下可观察到细胞发生染色质浓缩,细胞核凝聚和碎裂等典型的凋亡形态学改变;FCM检测结果显示细胞经姜黄素处理后出现明显的凋亡峰;免疫反应结果显示,凋亡相关基因bcl-2和P53表达水平降低,而bax和Fas表达水平升高.结论:姜黄素能显著抑制MG-63细胞增殖并可有效诱导其凋亡,其作用机制可能与bcl-2和bax二者的比值发生变化从而接受了凋亡刺激信号有关.

目的:检测慢性癫痫大鼠海马区脑组织内凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的含量变化,研究托吡酯对脑组织神经元保护机制.方法:腹腔注射海人酸(KA)建立慢性癫痫大鼠模型,通过腹腔注射不同剂量TMP对模型治疗4周,采用免疫组织化学方法对海马区脑组织内Bax、Bcl-2含量变化进行检测.结果:①正常组动物海马区脑组织内Bax阳性细胞少量表达,模型组表达明显高于正常组,差异显著(P<0.01);而给予TMP治疗后,Bax的表达与模型组相比明显下降,具有显著性差异(P<0.01);②正常组动物海马区脑组织内Bcl-2阳性细胞少量表迭,和模型组相比,无差异显著(P>0.05);而给予TMP治疗后,Bcl-2的表达与正常组和模型组相比明显升高,存在着显著性差异(P<0.01).结论:①癫痫大鼠海马区脑组织内Bax表达显著增高,导致神经元凋亡.②TMP可以降低海马区脑组织内Bax表达,增加Bcl-2的表达,起到神经元的保护作用.

本文旨在探讨小鼠皮层Bcl-2和Caspase-3在低氧预适应脑保护中的作用.将Bib/c近交系小鼠随机分为对照组、低氧组和低氧预适应组,用免疫荧光和激光共聚焦显微镜等技术测定皮层顶叶Bcl-2和Caspase-3表达荧光强度和阳性细胞计数.结果显示,低氧组和低氧预适应组Bcl-2表达均显著高于对照组,低氧预适应组又显著高于低氧组.低氧组和低氧预适应组Caspase-3表达均显著高于对照组,但低氧预适应组显著低于低氧组.结果表明,低氧预适应过程中,小鼠皮层脑区通过Bcl-2高表达和Caspase-3低表达抵御皮层细胞凋亡,从而参与脑保护机制.

目的 探讨人食管鳞状细胞癌组织P15、P27和Bcl-2的表达及其临床意义.方法 用免疫组化及Western blot方法 检测人食管鳞癌组织中P15、P27和Bcl-2的表达,结合病例随访资料分析其临床意义.结果 48例食管鳞癌病例获得完整随访资料,鳞癌组织中Bel-2的表达(90.5%)明显高于癌旁正常组织(6.3%)(P<0.05);高分化鳞状细胞癌组织中Bcl-2的表达(80%)明显低于低分化鳞癌(91.7%)(P<0.05);在有淋巴结转移的鳞癌中Bel-2的表达(100%)明显高于无淋巴结转移鳞癌(83.3%)(P<0.05).P15、P27在人食管鳞状细胞癌组织中的表达显著低于癌旁正常黏膜组织(P<0.05),而在高级别上皮内瘤变中P15、P27的表达就明显降低(P<0.05).结论 P15、P27和Bel-2的表达与人食管鳞癌的发生及进展有一定相关性;P15、P27表达的降低为食管鳞癌发生的早期事件,检测P15、P27和Bcl-2的表达对人食管鳞癌的早期诊断、判断预后有参考价值.

细胞凋亡是一个多种因子参与的复杂过程,如促凋亡因子Fas、FasL;抑凋亡因子Bcl-2、Bax等.为便于病理研究,作者对正常人外周血白细胞Fas、FasL和Bcl-2抗原的表达及与细胞凋亡的关系进行了观察,现将结果报告如下.

目的 研究肝细胞癌(HCC)中5-脂氧合酶(5-LOX)的表达与bel-2和bax表达的关系及其可能机制.方法 检测48例HCC癌组织及其癌旁组织,应用RT-PCR和免疫组织化学S-P法检测5-LOX、bel-2和bax的表达情况.结果 在癌、癌旁组织中5-LOX、bel-2和bax基因mRNA表达分别是30/48、33/48、24/48和12/48、9/48、36/48,与癌旁组织比较,差异有显著性(P＜0.05).HCC中5-LOX蛋白阳性率为56.3%,与bel-2蛋白的表达呈显著正相关(r=0.447,P＜0.01),但与bax蛋白表达呈显著负相关(r=-0.567,P＜0.01).结论 5-LOX与肝细胞肝癌的发生、发展关系密切;其机制可能是通过上调bcl-2及同时下调bax等凋亡相关调节因子表达水平有关.

目的 观察藤梨根乙酸乙酯提取物(RAE)对肺癌A549细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 体外培养肺癌A549细胞,分别给予不同浓度的RAE进行干预,流式细胞术检测用药后A549细胞凋亡率变化,免疫组化SP法检侧细胞Bel-2、Bax蛋白表达变化,RT-PCR法检测细胞Bcl-2、Bax mRNA表达,激光共聚焦显微技术测定细胞胞内Ca2+浓度变化.结果 各治疗组给予RAE作用后细胞凋亡率明显增加,并存在时相性和量效依赖性;用药后A549细胞Bcl-2蛋白和mRNA表达降低,而Bax蛋白和mRNA表达上调,细胞内Ca"浓度明显升高,与对照组比较均有显著统计学差异(P均<0.01),亦存在时相性和量效依赖性.结论 RAE可明显诱导肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与降低其Bcl-2蛋白和mRNA表达、上调Bax蛋白和mRNA表达、升高细胞内Ca"浓度有关.

目的 探讨卡维地洛对体外柯萨奇病毒B3(CVB3)致心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制.方法 采用差速贴壁法培养原代Wismr乳鼠心肌细胞.实验分为正常对照组、病毒组、卡维地洛组及美托洛尔组.正常对照组仅加入不含血清的DMEM培养液.后3组于CVB3感染心肌细胞后分别加入不含血清的DMEM培养液、无血清培养基配制的卡维地洛、美托洛尔溶液.72 h后在倒置相差显微镜下观察各组心肌细胞的形态、搏动速率;采用黄嘌呤氧化酶法测定其心肌细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定其心肌细胞培养液中丙二醛(MDA)水平,流式细胞术检测其心肌细胞凋亡率,免疫细胞化学法检测其心肌细胞内Bcl-2及Bax蛋白表达水平.结果 1.与病毒组比较,卡维地洛组心肌细胞搏动速率明显提高(P<0.05)、凋亡率明显降低(P<0.05),心肌细胞培养液中SOD活性显著升高(P<0.05)、MDA水平明显降低(P<0.05);美托洛尔组与病毒组比较,心肌细胞搏动速率、凋亡率、心肌细胞培养液中SOD活性、MDA水平均无统计学差异(Pa>0.05);2.与病毒组及美托洛尔组比较,卡维地洛组心肌细胞内Bel-2蛋白表达增多,而Bax蛋白表达减弱.结论 卡维地洛对体外CVB3感染的心肌细胞具有保护作用,作用机制可能与其具有抗氧化活性、增强心肌细胞内Bel-2蛋白表达、减弱Bax蛋白表达有关.

目的 研究大豆异黄酮对去卵巢大鼠阴道上皮Bcl-2和Bax表达的影响.方法 选择Wistar大鼠50只,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、大豆异黄酮高剂量组和大豆异黄酮低剂量组,每组10只,给药6周后处死大鼠,分离摘取阴道,常规石蜡包埋,切片进行HE染色及免疫组化凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果 大豆异黄酮能使去卵巢大鼠阴道的重量增加,上皮增厚,但作用弱于雌激素.模型组、阳性药物对照组、大豆异黄酮高剂量组、大豆异黄酮低剂量组Bcl-2的灰度值分别为57.692±4.49,116.847±9.95,101.345±5.87,109.56±9.11.Bax分别为168.049±11.43,106.49±9.58,121.34±15.78,119.82±20.89.结论 大豆异黄酮可促进阴道上皮Bel-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达.

目的 探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响.方法 体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg·L-1SBE处理48h,并以2.5mg·L-1顺铂(DDP)作为阳性对照.用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表迭.结果 与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P＜0.001).细胞凋亡率明显上升(P＜0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P＜0.01或P＜0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(P＜0.01或P＜0.05).结论 SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspaae-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关.

目的 探讨Survivin基因在胆管癌组织中的表达以及与bel-2和bax基因表达的相关性.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Survivin mRNA在64例胆管癌,22例癌旁组织及10例正常胆管组织中的表达,免疫组织化学方法测定胆管癌组织中bcl-2和bax蛋白的表达.结果 胆管癌组织中Survivin基因阳性表达率65.6%(42/64),显著高于其在癌旁组织(9.1%,P<0.01)和正常胆管(0%,P<0.01)中的表达;Survivin基因表达与胆管癌的性别、年龄、部位、分化程度、临床分期及淋巴结转移无明显相关(P>0.05).bcl-2和bax在胆管癌组织中的表达率分别为56.3%(36/64)N45.3%(29/64),Survivin基因表达与bcl-2表达正相关(r=0.404,P<0.01),与bax表达负相关(r=-0.373,P<0.01).结论 Survivin基因在胆管癌的发生、发展过程中可能起重要作用;Survivin有可能成为胆管癌基因治疗的新靶点;在胆管癌的发展中,Survivin与bel-2和bax分别起协同和拮抗作用.

目的 探讨去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡过程中Fas、bcl-2、caspase 8凋亡调节基因的相互关系及可能的作用机制.方法 流式细胞术分析去甲斑蝥素作用后细胞凋亡及增殖的变化,应用免疫细胞化学技术检测用药前后凋亡相关基因Fas、bcl-2、caspase8表达的变化.结果 去甲斑蝥素诱导的人食管癌Eca-109细胞发生形态改变.流式细胞仪分析结果 发现,食管癌Eca-109细胞在DNA组方图上出现典型的亚二倍体峰即凋亡峰,在细胞周期中的分布也发生了明显的变化.免疫细胞化学结果 显示.去甲斑螯素作用后食管癌Eca-109细胞Fas、caspase8蛋白表达明显升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 去甲斑蝥素能抑制食管癌Eca-109细胞增殖并诱导凋亡,其作用可能与上调Fas、caspase8蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达有关.

目的 探讨苦参素对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用及可能的作用机制.方法 采用MTT法检测PC-3细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测PC-3细胞周期改变,免疫组化法检测PC-3细胞中Bcl-2和Bax的表达.结果 随着苦参素浓度的增加和作用时间的延长,PC-3细胞生长抑制率呈明显上升趋势(P＜0.05).随着苦参素浓度的增加,G0/G1期和S期PC-3细胞所占比例逐渐上升,而G2/M期所占比例逐渐下降,同时Bcl-2表达下调,而Bax表达上调.结论 苦参素能通过诱导人前列腺癌PC-3细胞周期阻滞于G0/G1和S期,下调Bcl-2表达和上调Bax的表达抑制癌细胞的生长增殖.

目的:探讨白藜芦醇对宫颈癌Hela细胞生长抑制及诱导凋亡的作用机制.方珐:以不同浓度白藜芦醇处理Hela细胞,MaT法测定细胞增殖抑制率;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Bad、Caspase-9的表达.结果:经白藜芦醇处理的Heh细胞,增殖作用呈明显时效和量效关系,细胞凋亡率明显增高并呈浓度依赖性;Bel-2、Bax、Bad表达下降,Caspase-9表达增加.结论:白藜芦醇对Hela细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制与下调Bel-2、Bax、Bad蛋白、上调Caspase-9蛋白表达有关.

目的:探讨DCC(deleted in colometal carcinoma)基因在大肠癌组织中的表达情况及与Bel-2,Bax蛋白之间的关系.方法:采用免疫组织化学法结合图像分析技术观察74例大肠癌组织中DCC,Bel-2,Bax蛋白的表达情况.结果:大肠癌组织中,DCC蛋白失表达率为54.1%(40/74),其表达在不同的肿瘤分化程度(P＝0.002)及Dukes分期中有差异(P＝0.042);Bcl-2蛋白表达阳性率为60.8%(45/74),其表达与不同的大肠癌临床Dukes分期(P＝0.032)及是否有淋巴结转移(P＜0.001)中有差异;Bax蛋白表达阳性率为48.6%(36/74),在不同的大肠癌组织学类型、分化程度、Dukes分期及淋巴结是否转移中均无差异(P＞0.05).大肠癌中DCC蛋白表达与Bel-2表达水平呈负相关(r＝-0.201,P＝0.043),与Bax表达水平呈正相关(r＝0.296,P＝0.005).结论:大肠癌中DCC表达缺失频率较高,且可能通过上调Bel-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达阻止细胞凋亡,从而促进大肠癌发生.

目的 研究脑脉泰对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡和Akt、bcl-2、Bax、caspase3表达的影响.方法 采用大鼠大脑中动脉栓塞再灌注动物模型,将雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、脑缺血再灌注模型组(MCAO)、脑脉泰大剂量组(MCAO+脑脉泰2.24g/kg)、脑脉泰中剂量组(MCAO+脑脉泰1.12g/kg)、脑脉泰小剂量组(MCAO+脑脉泰0.56g/kg),每组10只大鼠.脑脉泰组在MCAO前5天开始灌胃给药,连续5 d.用TUNEL法和免疫组化染色法分别检测缺血半暗带凋亡细胞和Akt、bcl-2、Bax和caspase3表达.结果 脑脉泰大剂量组和中剂量组大鼠脑缺血半暗带的凋亡细胞显著减少(P<0.01),Akt、bcl-2表达显著增加,caspase3和Bax表达减少,与MCAO模型组比较,有显著性差异(分别为P<0,05和P<0,01).结论 脑脉泰对脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其保护作用与促进Akt和bcl-2的表达,抑制Bax和caspasse3的表达有关.

目的:探讨葛根素对大鼠脊髓继发性损伤的保护作用.方法:成年雄性SD大鼠,采用改良的Allen's打击法制成急性脊髓损伤模型后,比较1、6、12、24、48 h葛根素处理组与模型组的血浆超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)的差异性以及Bel-2和Bax基因蛋白表达情况.结果:葛根素能明显提高脊髓损伤大鼠血浆SOD的活性,降低血浆MDA的含量,并使大鼠脊髓Bcl-2基因表达蛋白产物增加,Bax基因表达蛋白产物减少.结论:葛根素在脊髓损伤早期可以提高SOD的活性,降低MDA的含量,并能有效上调Bel-2表达及下调Bax表达,对脊髓的继发性损伤有保护作用.