食用油的消化处理一直是分析工作者的难点。常规方法有干法灰化和湿法消解两种，［1］其主要缺点是消化时间长，不易消化完全，易引起沾污，一些易挥发性元素(如As等)在消化时易损失。本文采用微波消化食用油试样，克服了上述缺点，消化液用端视ICP-AES法测定，该法具有一次顺序或同时测定多元素的优点，以较广泛应用于各类试样中微量元素的测定。［2，3］本文报道用微波消解端视ICP-AES法测定食用油中的Pb、As、Cu、Fe、Ni，方法简便、快速、准确，曾用于食用油中上述元素测定，结果令人满意。
蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果.
肺螨病是某些螨类寄生于人体肺部所致的一种疾病，已证实在国内有一定的感染率［1］。由于该病无特异的临床表现，诊断困难，故临床报道尚少，作者自1993年起应用NaOH消化离心沉淀法对来本站门诊部就诊的部分呼吸道患者的痰液进行了螨虫检测并加以分析，现报道如下。1 资料与方法 共检测呼吸道患者126例，其中男89例，女37例，年龄6～54岁，平均年龄为41.5岁；病程0.5～21年，表现为不同程度的临床症状，抗菌素治疗无明显好转。 收集患者24 h痰液和清晨第一口痰液，加入痰液等量的5% NaOH于痰液中，随即搅拌混匀，消化时间为3 h～4 h，以痰液消化成无痰块和粘液为适宜，将消化后的痰液放入离心管中离心沉淀，离心速度为2 000 r/min，时间为10 min，倒出上清液，取沉渣涂片镜检螨虫，每例标本涂片3张。2 结果2.1 病患组螨虫的感染率、临床表现及治疗 126例患者的痰液中，检出痰螨阳性者48例，感染率为38.1%。阳性患者均具有不同程度的呼吸道症状，X线胸片有异常征象、嗜酸性粒细胞有不同程度的增高，均确定为肺螨病，用甲硝达唑治疗，每日剂量0.8 g，给药3个疗程，每疗程7 d，痰液复查45例转阴，转阴率为93.75%。
目的 观察消化时间对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛素的最佳消化时间.方法 将75只雄性SD 大鼠根据随机化原则按消化时间分为5组:Ⅰ组(10 min)、Ⅱ组(12.5 min)、Ⅲ组(15 min)、Ⅳ组(17.5 min)和Ⅴ组(20 min),每组15只.通过胆总管灌注胶原酶Ⅴ来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛.以双硫腙染色鉴定胰岛,丫啶橙/碘丙啶染色鉴定胰岛细胞活率,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能.结果 分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活率为90%左右,体外培养中生长良好.在不同消化时间下,各组胰岛产量由低到高为:10 min组<20 min组<12.5 min组<17.5 min组<15 min组.消化时间在15 min时,获得胰岛产量最高(P < 0.05),获得的胰岛数量和IEQ量分别为445.27±66.50和614.46±85.50.其次为17.5 min组,获得胰岛数量和IEQ量分别为401.80±62.80和539.84±76.89.在低糖和高糖刺激下胰岛素释放分别为(1.346±0.128) ng/mL和(2.565±0.208) ng/mL,差异具有统计学意义(P < 0.05),刺激指数为1.908±0.152,提示胰岛细胞功能良好.结论 进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度在最佳消化时间为15～17.5 min,可获得稳定高产量的胰岛,过短和过长的消化时间都是不适宜的.
对于组织的并购,无论是产品、服务还是人员的调整,新组织都需要相当长的消化时间.而更需要细嚼慢咽的是组织文化和人才.管理上的挑战是艰巨的.所以,无论从业务上和资本上看起来多美妙的并购,管理的整合和文化整合才是渗透在以后工作中的难题.
1.吃饱就困偶尔一次不必担心,但如果经常这样,则可能是身体报警,表明你的饮食结构有缺陷,如饮食中精制面粉、含糖饮料和甜食等简单碳水化合物比重太大.长期吃下去易患糖尿病.本刊建议:多摄入复杂碳水化合物,如燕麦、玉米、糙米等全谷食物,各种蔬菜、水果(而非果汁)等.这些食物消化时间长,不会导致饭后血糖猛升.2.薯片上瘾三天不吃爆米花、薯片就难受,表明你已经上瘾了.
故事一某公司的策划总监王丽,最近工作非常顺利,在赶完一份策划案的同时又谈成了一笔生意,下班后来到餐馆大吃一顿犒赏自己.她满足了口福十分惬意,可是晚上却失眠了.后来她问了朋友李医生,李医生告诉她,晚上吃得太多,或吃进一堆高脂肪的食物,会延长你的消化时间,因此导致夜里无法正常入睡.
化妆品中砷测定样品前处理多采用GB7917.2-87化妆品卫生化学标准检验方法中的湿式消解法。在实际工作中我们发现按此法进行样品前处理浪费试剂、消化时间长，易炭化且不易消化彻底。针对上述现象，我们进行了改进，结果令人满意。现介绍如下。
测定食品中蛋白质的含量是衡量产品营养成分高低最重要的指标.经典的测定方法[1]费时.而先进的全自动蛋白质测定仪价格昂贵,并且需要用专门试剂,现阶段难以普及.本文对经典的蛋白质测定方法进行改进,在应用传统催化剂的同时,滴加过氧化氢加速其消化过程,使消化时间大大缩短,使大批量蛋白质测定成为可能.现介绍如下.
1、消化食物：24小时
食物3秒钟即可吞下肚，但在人体中的消化时间却会持续一整天。伦敦大学胃肠病学专家安顿?艾曼纽尔博士表示，食物进入胃中，在胃酸的帮助下，会以每分钟3～4卡的速度被分解，油腻食物消化时间则更长。一顿600卡的晚餐在胃中消化只需2～3个小时，之后20小时，食物会进入肠道消化。
控制进食和能量平衡信号可分为短期和长期两类.短期信号包括神经系统(如迷走神经)、营养物质以及来源于胃肠道的多肽激素,其作用根据进食多少和消化时间来变化,并不是脂肪组织储存能量的主要决定因素[1].长期信号由脂肪组织(如瘦素)或胰腺(如胰岛素)分泌,与基础能量储存相关,在较长一段时间内根据能量储存信息发生波动.
目的：原代心肌细胞培养是一项重要的体外实验技术，为建造心血管疾病相关模型提供了重要的基础保障。文中旨在通过探讨不同消化时间对原代心肌细胞培养的影响，得到一套简便易行并且能获得较高成活率、纯度及活性的原代心肌细胞的培养方法。方法采用单消化酶多次消化心肌组织，根据消化时间分为8 min组和10 min组，差速贴壁法和5-溴-2-脱氧尿苷抑制法获得纯度较高的心肌细胞。光学显微镜下观察心肌细胞形态，记录镜下不同区域心肌细胞搏动频率测定细胞活力。用台盼蓝染色法检测培养细胞的存活率，横纹肌肌动蛋白鉴定心肌细胞。最后建立心肌细胞肥大模型，比较实验组（血管紧张素Ⅱ）和对照组[10％FBS DMEM （ H＋）培养基]的细胞截面平均面积。结果与8 min组比较，10 min组原代心肌细胞大部分伸出伪足相互接触交织成网，逐渐形成细胞簇，立体感明显，细胞搏动及收缩更为明显而有力。分离纯化后原代心肌细胞的平均存活率均＞90％，10 min组平均存活率显著高于8 min组[（95．4±0．8）％sv （93．0±0．8）％，P＜0．05]。α-actin免疫细胞化学染色鉴定，8 min组和10 min组原代心肌细胞的阳性率均＞95％。血管紧张素Ⅱ作用48 h后，10 min组原代心肌细胞实验组心房钠尿肽（atrial natriuretic peptide， ANP）、细胞截面平均面积较对照组表达均显著升高[（20．8±0．7） vs （15．8±0．5），（34．77±8．43）μm2 vs （14．11±4．29）μm2，P＜0．05]，而消化时间为8 min的原心肌细胞截面平均面积和ANP值未见显著变化。结论采用消化时间为8 min的原代心肌细胞培养方法具有简便、省时、易操作等特点，最重要的是能够获得较高质量的心肌细胞。
目的探讨长期甲醛固定的大鼠视网膜胰蛋白酶消化的最佳消化时间和最佳胰蛋白酶浓度。方法健康♂ SD大鼠，颈椎脱臼处死，摘取眼球，放入4％甲醛固定液，固定时间为2 d、2周、4周、3月、5月、7月。分离固定不同时间的视网膜，放入3％、6％、9％胰蛋白酶消化，37℃恒温箱孵育。分别记录固定不同时间的视网膜在3％、6％、9％胰蛋白酶中消化完全所需时间。铺片操作，行 PAS 染色。显微镜下记录视网膜消化情况。结果新鲜眼球常规固定48 h，3％胰蛋白酶37℃消化3.5 h，视网膜消化完全。对于甲醛固定2周及1月的大鼠眼球，采用常规胰蛋白酶浓度（3％），仅延长胰蛋白酶的消化时间至9 h 及14 h，可以达到常规固定组织的消化效果。对于固定3月的大鼠眼球，采用常规浓度的胰蛋白酶仅延长消化时间至22 h，同样可以得到完整的视网膜血管铺片，且提高胰蛋白酶浓度对于缩短视网膜消化时间的影响不大。而对于固定5～7月的大鼠眼球，6％和9％浓度的胰蛋白酶可以在一定程度上缩短视网膜消化的时间至22 h 和28 h，有利于得到相对完整的视网膜血管。结论固定时间短于3月的眼球组织，采用3％胰蛋白酶消化，延长消化时间可达到最佳消化效果。对于固定5～7月的视网膜组织，不仅需要延长消化时间，还需要通过提高胰蛋白酶浓度至6％，才可以获得最佳消化效果的视网膜血管。
用凯氏定氮法测定样品中总氮含量时,消化时间的长短会直接影响检测结果.我们在检测脑蛋白水解物注射液的总氮时根据不同的消化时间设计了一套对比试验,结果表明消化时间40min左右时最理想,时间过长或过短都会使检测值偏低.
食品卫生标准中食品分析试样的前处理一般采用干法灰化和湿法酸水解法,其主要缺点是消化时间长,消化过程中使用大量的酸且消化不彻底.微波消解法克服了以上缺点,是一种比较先进的样品处理方法[1].
食品中总汞的冷原子吸收测定按国标法进行样品前处理,采用压力消解法或回流消化法和五氧化二钒消化法(GB/T 5009.17-1996).压力消解法虽有不少优点,但需专用设备,消化时间需3～4 h,其他两法消化时间还要长一些.2000年5月至2001年6月用HNO3-H2SO4-HCl混合酸消化鱼样品,结果令人满意.
新的国家标准[1]规定了牛乳中的蛋白质含量,由于牛乳的特殊性,因此用凯氏定氮法[2]测定时消化时间长,且不易掌握.本文对比色法测定牛乳中蛋白质进行了探讨,获得较为满意的结果.
食用油的消化处理一直是食品化学分析的难点.常规方法有干法灰化的湿法消解两种[1],其主要缺点是消化时间长,不易消化完全,消耗试剂多且易引起沾污.而已建立的微量元素分析方法有化学比色法[2]、原子吸收光谱法[2-3]、极谱法[4]等,这些方法大都具有操作复杂,分析周期长等缺点.
保健食品由于添加了各种营养成分和微量元素,因此服用保健食品是目前社会上很流行的一种保健方法.测定其微量元素是保证产品质量的一项重要指标.由于保健食品成分比较复杂,因此采用常规消化方法比较困难,且有消化时间长,消化不完全,消耗试剂多易引起沾污等缺点.而已建立的微量元素分析方法有化学比色法[1]、原子吸收光谱法[1-2]、极谱法[3]等,多有操作复杂、分析周期长或精密度不高等缺点.
汞是具有蓄积作用的有害元素,因此在常规化妆品卫生监督检验中[1],其常常被列为重点监测项目.样品前处理方式有湿法消解[2]及酸浸提[3].本文针对敞开式湿法消解样品易导致汞损失、消解试剂用量大易引入沾污等缺陷,采用微波消化样品,由于在高压密封罐中进行,所需试剂少、汞元素损失少、消化时间短.再联用高灵敏度的原子荧光光谱法测定,方法准确、快速、方便.现介绍如下:
心肌细胞分离方法在不断得到改进.根据实验目的的不同,不断调整分离程序及方法[1～3].但要得到高产量,有持久(＞2 h)兴奋性和收缩功能的心肌细胞,仍不是一件容易的事[3],尤其是我们在整体或离体心脏复制各种疾病模型(缺血,心肌肥大等),要在单心肌细胞功能方面研究其病理生理机制时.胶原酶消化分离出的心肌细胞在产量及活力方面受胶原酶, 缓冲液成分,pH,温度,灌流量及消化时间的影响[3,4].
RNA原位杂交技术在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析,已成为最有效的分子病理学技术之一[1].用寡核苷酸探针检测组织切片中相关的mRNA是较为常见的RNA原位杂交[1],而Telomerase Reverse Transcriptase(TERT)又是较为常用的原位杂交检测试剂盒,其探针较短,组织穿透性好,有较高的灵敏度.由于在大多数的恶性肿瘤中存在着TERT-RNA,所以,TERT-原位杂交检测方法可以应用于众多的恶性肿瘤的诊断.但由于该方法存着消化时间、杂交时间、温度难以掌握以及杂交液滴加多少较难控制等技术难点,常常会使结果出现假阳性或假阴性.我们采用TERT-原位杂交检测方法对舌癌标本进行了检测,经过反复的实践、改进,解决了许多的难点,获得了比较满意的结果,现报道如下.
目的 探讨人成纤维样滑膜细胞原代培养的改良方法 .方法将骨关节炎患者的滑膜组织机械分离后用Ⅱ型胶原酶分别消化0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h.离心去上清,将细胞及未消化完全的组织块混合物转入培养瓶培养.待细胞贴壁后分别计数不同消化时间的贴壁细胞数,待细胞生长良好后,进行免疫荧光鉴定.结果 细胞生长状态良好,不同消化时间下培养24 h后均可观察到大量细胞贴壁且呈梭形,并可见成纤维样滑膜细胞从组织块下方爬出.经胶原酶消化12 h后的贴壁细胞数最多(P<0.05).免疫细胞化学染色显示培养的细胞波形蛋白和CD90/Thy-1阳性.结论 单独的Ⅱ型胶原酶消化法可以获得成纤维样滑膜细胞,最佳消化时间为12 h.
目的 探讨凋亡样品制备时,胃蛋白酶消化时间对凋亡的影响.方法 采用0.5%胃蛋白酶分别对胃癌、食管癌、乳腺癌、淋巴瘤和卵巢癌细胞株进行消化,观察不同时间点流式细胞术PI染色法检测凋亡的情况.结果 多数细胞株消化时间在20～30 min时所形成的凋亡峰位较好,而肝癌、淋巴瘤细胞则在15～20 min时形成的峰位较好.结论 流式细胞术PI染色法检测凋亡时,需不断摸索实验的条件,才能得到最佳结果.
神经细胞原代培养是研究神经细胞形态及功能的重要手段之一.传统方法是将神经细胞与神经胶质细胞混合培养,无法满足在单一神经细胞培养基础上进行实验研究的需要.本实验在传统培养方法的基础上加以改良,对原混合培养方法在胎龄、取材、温度、消化、换液、抑制剂、机械操作等方面进行了控制和改进.本培养方法具体改进如下: 1.运动神经细胞取自E14大鼠胚胎的脊髓.因为胚胎运动神经元形态分化和化学分化程度较低,体外存活能力强,E14胎鼠脊髓易剥离.而传统方法是取E12～E16.E1 2胎鼠组织太嫩,不易分离;E16胎鼠脊柱已部分骨化,血液太多,挑离脊髓时易形成撕裂损伤.2.取材时将脊髓沿冠状面切开,取脊髓腹侧半,改变传统的整个脊髓培养,以达到培养单一运动神经元的目的.3.整个取材过程在冰袋上进行,更好的保持细胞活力.4. 严格控制胰酶的浓度和消化时间.胰酶浓度是0.125%,37℃二氧化碳孵育箱内消化 0.5hr较好,采用4℃含血清的DMEM液适时终止反应.为避免组织丢失,改吸弃胰酶为吸组织于另一试管中,且迅速终止消化反应.5.减少传统方法中的吹打次数,用弯头吸管代替直头吸管吹打;取消离心或细胞筛过目等步骤,降低细胞损害程度.6.细胞种植后改传统换全液为换半液,改传统培养2d换液为定时观察,按需换液.这样不仅保证了细胞在已适应了的环境中生长,并且减少了污染的机率.7.本方法不使用抑制剂,减少药物对运动神经元的损伤,使神经细胞在更接近于体内自然环境中生长.种植细胞1～2hr即可观察到细胞贴壁,胞体呈圆形,饱满、透亮,有短的突起出现.因此,本方法的优点是: 不仅能够大大缩短从取材到种植的时间,提高运动神经元的活性,而且成功的获得了相对单一的运动神经元培养物(纯度达90%以上),为进一步开展神经生物学研究提供了相对稳定的体外模型.
目的：比较胶原酶的不同消化时间，观察所获得的间充质干细胞的数量，确定最为理想的消化时间。方法：分别采用3h、5h、7h的消化时间分离脐带间充质干细胞；通过传代进行纯化和扩增培养，绘制生长曲线；用流式细胞仪检测其表面标志。结果：分离出的间充质干细胞贴壁后为梭形，呈平行排列生长或漩涡状生长，并且消化时间为5h时收获到的细胞数量最多；流式细胞仪检测结果显示，获得的间充质干细胞均表达CD73、CD105、HLA－ABC，不表达CD34、CD45、HLA－DR。结论：胶原酶消化法从人脐带中分离培养的细胞具有间充质干细胞的生物学特性，并且消化5h收获得的间充质干细胞数量最多，生长状况最好。
●不可不知饭后别马上吃"消食水果"很多人习惯餐后立刻吃水果,并美其名曰"消食水果".其实,食物进入胃内需经过1～2个小时的消化才能缓慢排出,如果是一顿充满蛋白质和脂肪的大餐,消化时间甚至需要6～7个小时.
