目的:建立血脂康的活性测定方法,用于血脂康的质量控制研究.方法:建立3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶)酶促反应,即HMG-CoA还原酶量为3.125×10-4U,烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)量为160 nmol·L-1,羟甲基戊二酸单酰辅酶A (HMG-CoA)量为5 nmol· L-,反应时间为50 min的反应体系,加入洛伐他汀酸系列工作溶液,采用LC-MS/MS方法测定体系中产物甲羟戊酸的量,计算抑制率,得到洛伐他汀酸浓度-抑制率曲线.将血脂康样品溶液加入到酶促反应体系中,根据抑制率计算血脂康活性成分的含量.结果:洛伐他汀酸浓度为10～500 ng·mL-1范围内抑制效应显著,质量控制样品的准确度和精密度范围分别为95.28％ ～ 101.53％,7.08％～10.51％;平均加样回收率为100.25％,RSD为2.27％.检测得到3批血脂康胶囊活性成分的含量以洛伐他汀酸计分别为每粒4.86,4.71和4.56 mg.结论:建立的方法精密度好,准确度高,可用于血脂康胶囊的生物活性测定.酶法测定结果显著高于HPLC法的测得值,推测血脂康中可能有其他成份在同时发挥抑制HMG-CoA还原酶的作用.本研究结果对血脂康的质量控制具有指导意义.
目的 研究高脂血症大鼠模型中甘草对洛伐他汀药代动力学过程的影响.方法 将18只SD大鼠随机分为对照组(n=6)和实验组(n=12).实验组采用高脂饲料喂养大鼠,构建高脂血症大鼠模型,随机分为洛伐他汀单独给药组(n=6)和洛伐他汀与甘草联合给药组(n=6).联合给药组给予甘草颗粒,单独给药组给予相应体积的生理盐水,连续7d后,2组大鼠单剂量灌胃给予洛伐他汀胶囊(20 mgkg,0.5％ CMC-Na溶液).分别于给药前和给药后不同时间点采集血浆样品,采用液相色谱-质谱联用方法测定血药浓度,计算药代动力学参数,并进行组间比较.结果 长期给予甘草导致洛伐他汀代谢产物洛伐他汀酸在高脂血症大鼠中血浆暴露水平显著升高,联合给药组平均Cmax较单独给药组升高约80％(P＜ 0.05),而AUC0-t和AUC0-x分别升高115％和109％(P=0.005和P=0.027).联合给药组与单独给药组比较,洛伐他汀的Cmax和AUC增加,但无统计学差异(P＞0.05).结论 甘草可抑制洛伐他汀在高脂血症大鼠体内的代谢,增加其体内暴露水平.
目的 建立测定大鼠血浆中洛伐他汀(lovastatin,monacolin K,MK)及其活性代谢产物洛伐他汀酸(monacolin K acid,MKA)浓度的超高效液相三重四级杆线型离子阱串联质谱(UPLC-QTRAP-MS/MS)检测方法,并将其应用于药动学研究.方法 采用乙酸乙酯萃取血浆样品,以辛伐他汀为内标,采用Agilent ZORBAX C18(2.1 mm×50 mm,1.8 μm)为色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸为流动相,梯度洗脱流速为0.4 mL·min-1,柱温为40℃.以正离子多反应离子监测模式,用于定量分析的离子对分别为m/z 405.1→225.1 (MK),m/z 423.2→ 199.2(MKA),m/z 419.2→199.1(辛伐他汀).结果 MK和MKA的线性范围分别为0.08～80.0 ng.mL-1和1.60～1 600.0 ng·mL-1,其定量下限分别为0.08,1.60 ng·mL-1;MK和MKA的日内和日间精密度均＜9.0％,准确度在-5.18％～6.83％内;MK和MKA的提取回收率均≥72.26％,RSD均≤10.83％;MK和MKA的基质效应在91.11％～105.73％,RSD均≤7.46％;MK和MKA的Cmax分别为(136.22±30.25)ng·mL-1和(212.57±33.92)ng·mL-1,Tmax分别为(1.58±0.11)h和(2.15±0.26)h,t1/2分别为(35.42±12.67)h和(17.86±6.15)h,AUC0-24分别为(279.92±44.18)ng·h·mL-1和(390.34±20.15)ng·h·mL-1.结论 该方法快速、灵敏、准确,可用于MK和MKA在大鼠体内的药动学研究.
目的 建立利用HPLC法同时测定红曲中酸式及内酯式洛伐他汀含量的方法.方法 通过内酯式洛伐他汀的标准品碱式水解转化制备酸式洛伐他汀的标准品,采用HPLC法测定保健红曲中洛伐他汀的含量,75％乙醇为提取溶剂,40℃超声提取样品,使用Thermo C18柱(5μm,250mm ×4.6mm)色谱柱,以乙腈:0.1％磷酸溶液(65∶35)为流动相,检测波长为238 nm,流速1.0 ml/min,柱温30℃.结果 酸式洛伐他汀在5.2 μg/ml～105.0 μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),检出限为0.090μg/ml,平均回收率为98.0％,相对标准偏差为1.1％;内酯式洛伐他汀在6.9 μg/ml ～ 138.0 μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),检出限为0.107 μg/ml,平均回收率为98.6％,相对标准偏差为1.3％.结论 本方法简单、快速、准确,可同时测定保健红曲中酸式与内酯式洛伐他汀的含量.
目的:建立血脂康胶囊中的洛伐他汀和洛伐他汀酸HPLC定量分析方法.方法:利用HPLC法,采用YMC-C 18柱(150 mm×4.6mm,4μm),流动相为甲醇:10 mmol·L-1甲酸铵-0.2％甲酸水溶液(73:27),流速为1.0 ml·min -1,检测波长为237 nm.结果:洛伐他汀的线性范围为1.649～9.891 μg(r =1.0000),平均回收率为98.5％(RSD =2.31％,n=6)；洛伐他汀酸的线性范围为0.221～1.327μg(r=1.000 0),平均回收率为96.3％(RSD=2.03％,n=6).结论:本方法专属性强、结果准确、简便可行,可用于血脂康胶囊及其它相关天然他汀类药物的质量控制.
目的 建立高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血浆中洛伐他汀及其活性代谢物洛伐他汀酸的浓度.方法 样品用乙酸乙酯∶二氯甲烷(体积比为1∶1)提取浓集后进样,色谱柱为Phenomenex Gemini C18(50×3 mm, 3 μm),流动相为乙腈-水(85∶15).质谱采用ESI离子源MRM模式检测,以辛伐他汀为内标,按内标法定量. 洛伐他汀、洛伐他汀酸和内标的检测离子对分别为质荷比(m/z)427.4→325.4、445.4→343.4和436.4→325.4.结果 洛伐他汀在0.031～64 μg/L范围内线性关系良好(r=0.9987),最低定量限为0.031 μg/L,方法 回收率在96%～102%之间,日内、日间精密度相对标准偏差(RSD)分别小于5.3%及9.3%.结论 本文建立的方法 准确、灵敏,可用于洛伐他汀血药浓度测定及药代动力学研究.
