碳酸酐酶(carbonic anhydrase,CA)又称碳酸脱水酶,是一种催化CO2水合反应和碳酸脱水反应的酶,在调节各种组织电解质、液体和酸碱平衡中起重要作用.CA广泛分布于红细胞、胃小管上皮细胞、胃腺壁细胞、破骨细胞、胰腺、唾液腺及神经胶质细胞中.在评价周围神经趋化性再生作用的强弱、鉴别感觉神经纤维和运动神经纤维时常用碳酸酐酶组织化学法作定量或半定量评价.Riley[1]于1981年将碳酸酐酶法用于鉴别外周神经的感觉神经,其酶染色的作用结果是形成黑色颗粒,此法能使感觉神经轴突着色,而运动神经纤维不着色.但由于这种方法在染色时非特异性染色太强,影响结果判定.我们在实际操作中对此法进行改进,提高了染色效果,报告如下.
晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)是蛋白质的氨基组、还原糖的醛基之间发生非酶促糖基化反应的终产物.蛋白质的非酶糖基化,又称Maillard反应.反应早期生成不稳定、可逆的Schiff碱,随后Schiff碱经过化学重排,形成较为稳定的酮胺键化合物Amadori产物,Amadori产物或其降解的多种高度活性的羧基化合物,反过来与其他游离的氨基酸基团反应,经过一系列化学重排和脱水反应,最终形成复杂稳定不可逆的晚期产物,即AGEs.典型的AGEs呈褐色具有产生荧光、发生交联的特征[1].
盐酸多西环素脱水反应中,控制脱水反应时间为5h,中和料液pH为2.0,加对甲苯磺酸与氯代物的比率为0.6:1的最佳反应条件下,脱水收率能达到80%以上,含量达到96%以上,能够有效降低生产成本,具有较大经济价值.
晚期糖基化终产物(AGE)是蛋白质的氨基组、脂质和脂蛋白与糖的醛基组之间的非酶性糖基化/氧化反应的终产物.反应早期生成可逆的Schiff碱,该早期产物经过结构重建,转化成较为稳定的amadori产物,而后再经过一系列化学重排和脱水反应,产生不可逆的晚期产物即AGE.正常人体内该反应进行得非常缓慢,通常只发生于某些转换率很低的蛋白质如基质蛋白.蛋白质一旦被AGE修饰,即丧失其生理功能,将通过巨噬细胞等细胞表面AGE受体而被摄取、降解、清除.因此,正常情况下AGE修饰蛋白作为一种信号参与了机体清除衰组织以及结构重建的过程.
