我国现行的人用浓缩地鼠肾细胞狂犬病疫苗,虽然免疫效价可达到2.5IU/剂以上,但因其为3～5倍的浓缩液,杂蛋白含量高,接种者副反应率明显上升.为此我们用蔗糖密度区带离心法、DEAE-sepharose离子交换柱层析法及sepharose凝胶柱层析法,对浓缩疫苗进行纯化效果试验.
经过Sepharose 4FF凝胶柱层析法纯化的人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗,其杂蛋白去除率可达99%以上,副反应率较现行的3～5倍浓缩疫苗明显降低,免疫效价可达3.50IU/ml以上,值得大力推广并最终取代浓缩疫苗.在深入研究纯化工艺最佳条件时,发现待纯化的浓缩疫苗蛋白浓度的高低直接影响纯化后疫苗的质量,要达到理想的纯化效果,样品蛋白浓度应在40mg/ml以下.
传代Vero细胞狂犬病疫苗较原代地鼠肾细胞狂犬病疫苗具有效价高,工艺简单,无外源因子污染,易于大规模生产的优点.其浓缩液经过Sepharose 4FF凝胶柱层析纯化后[1],其杂蛋白去除率可达99%以上,一、二期临床试验证明副反应率极低,且免疫效价可达4.5IU/ml以上,高于<中国生物制品规程>所规定的2.5IU/ml要求.在深入研究纯化工艺最佳条件时,发现待纯化的浓缩疫苗上样量的多少直接影响纯化后疫苗的质量.对此,我们做了研究,结果报告如下.
狂犬病是病死率最高的急性传染病,目前尚无特异的有效治疗.被犬、猫等动物咬伤后,主 要通过注射狂犬疫苗来预防狂犬病,故疫苗的有效保护就显得极为重要.为了解浓缩疫苗和 精制疫苗的免疫效果,我们对1680例被犬、猫等动物咬伤者注射浓缩狂犬疫苗或精制狂犬疫苗后进行抗体检测,结果报告如下.
近年慈溪市豢养宠物逐年增多，被宠物或其它动物咬伤者大多到防疫站门诊部注射国产狂苗。目前国内由于经济原因，生产和使用大多是未纯化的浓缩地鼠肾组织培养狂苗，虽然理论上较安全，但由于几年来大量使用，时有副反应发生，现总结报告如下：1 材料与方法 12350例均为1994年10月至1998年6月在慈溪防疫站门诊部注射狂苗者。一般群众都知狂犬病死亡率几乎达100％，再加上医务人员注前叮嘱所以绝大部分注射狂苗出现副反应者均到本门诊部复诊。男8366例，女3984例，年龄0.3～81岁，平均33.4±19.4岁。注射国产狂苗均为上海、成都、兰州生物制品研究所生产的地鼠肾组织培养浓缩疫苗，注射疫苗前，常规伤口消毒，伤口尽量开放，一般咬伤者注射5针，多处或严重咬伤者注射7针，儿童剂量酌减，疫苗2～8℃冷藏，注射期间忌酒、浓茶等刺激性食物及剧烈劳动与运动等。诊断为狂苗副反应者均排除其它原因。
经过Sepharose 4FF凝胶柱层析法[1]纯化的人用地鼠肾细胞狂犬病疫苗,其杂蛋白去除率可达99%以上,副反应率较现行的3-5倍浓缩疫苗明显降低,且免疫效价可达3.7IU/ ml以上,值得大力推广并最终取代浓缩疫苗.在深入研究纯化工艺最佳条件时,发现待纯化的浓缩疫苗上样量的多少直接影响纯化后疫苗的质量,研究结果表明,上样量为柱床体积的 10%以下时,纯化效果最佳.
1 疫苗生产从量变到质变自从70年代起,我国则开始研制地鼠肾细胞狂犬疫苗,1980年国家卫生部正式批准投入生产.到90年代后,人用狂犬疫苗年生产能力达到500-600万人份.疫苗主要用于治疗和预防狂犬病.应用证明该疫苗具有一定免疫效果,副反应亦较轻.但临床上也有免疫失败的案例报到,其原因除个别未能注射完全程外,疫苗抗原量偏低是主要原因之一.为此,1994年开始决定改为浓缩疫苗,对疫苗原液进行了3-5倍的浓缩,并逐步替代"淡苗".但由于在产品更新过程中,部分生产厂家因经费与设备不足,仍继续生产.淡苗市场上一时出现"淡苗" 、浓缩苗并存的现象.个别推销商为了谋利甚至以劣充好,上门推销本厂产品.
