功能性低聚糖是一种以蔗糖、淀粉为原料,用酶法转化而成的纯天然新糖源.它由于其独特的生理功能现已成为一种重要的功能性食品基料,风靡日本、美国、西欧的食品市场.目前在日本,这种功能性低聚糖已取代或部分替代蔗糖而广泛应用在饮料、糖果、糕点、冰淇淋、乳制品及调味料等各种食品的生产中.它的生理功能为:
微生物转化是指利用微生物代谢过程中产生的酶催化底物发生化学反应,又称为微生物酶法转化,可直接应用微生物,也可用从微生物中提取的酶作为催化剂.目前微生物转化已应用于多种药物如抗生素、维生素、甾体激素、氨基酸、芳基丙酸和前列腺素等的合成[1].
甾体皂苷是中药中一类较为复杂的糖苷类化合物,具有多方面的药理活性.生物转化是利用各种酶系或微生物对天然活性化合物进行生物合成与结构修饰.利用生物转化技术可以对甾体皂苷类化合物完成化学法难以进行的结构改造和修饰,从而获得具有更高药用价值的目标化合物.本文对近几年利用微生物和酶法转化对甾体皂苷结构修饰的研究进展进行了综述,并分析了甾体皂苷生物转化研究中存在的问题,展望了其研究的前景.
为探讨黑曲霉B2所产β-葡萄糖苷酶对几种中药糖苷类化合物的转化能力,本研究通过硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex离子交换色谱等方法对黑曲霉B2所产β-葡萄糖苷酶进行了初步分离纯化,并以TLC法检测其酶解产物.结果表明,黑曲霉B2所产β-葡萄糖苷酶可在30 min内将各种中药糖苷类底物完全转化为相应苷元.表明该酶能够高效水解不同的中药糖苷类底物,具有较好的应用潜力.
目的:构建分泌表达α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-Cyclodextrin Glycosyltransferase ,α-CGTase)的重组菌株,并利用该酶液制备AA-2G。方法经PCR扩增浸麻芽孢杆菌154基因组获得α-CGTase基因序列,将该基因序列和pET26b载体分别经Nco I、Xho I双酶切后用T4 DNA连接酶连接,并转化大肠杆菌BL21。利用发酵培养基分泌表达α-CGTase,利用该酶和淀粉糊精、维生素C反应制备AA-2G,并进行制备条件优化。结果在大肠杆菌中实现了α-CGTase的胞外分泌表达,胞外环化酶活力达到120 U/mL,利用该酶的转糖基反应将淀粉糊精、维生素C转化为AA-2G,经HPLC检测正确。结论利用自制α-CGTase得到了AA-2G,通过制备条件优化AA-2G产量为17.46 g/L,转化率达到58.2%(mg/mg)。
目的:研究利用酶法在体外条件下,将防风中含量较高的色原酮类成分升麻素苷,转化为体内高吸收主要人血性成分升麻素,并优化其转化条件.方法:首先从防风中分离制备升麻素苷,然后利用植物精提复合酶SPE-007转化升麻素苷为其苷元升麻素,并采用HPLC法,以升麻素苷的转化率为评价指标,在单因素分析的基础上对酶解反应条件(酶解时间、酶解温度和酶浓度)进行优化.结果:酶浓度、酶解温度、酶解时间对酶法转化升麻素苷具有显著影响,其最佳酶反应条件为:酶浓度1.1 mg·mL-1,酶解温度48℃,酶解时间48 h.在此条件下,升麻素苷较完全地酶解转化为升麻素.结论:利用酶法转化传统中药有效成分已成为开发中药高活性成分的重要手段,酶法转化中草药中有效成分因其反应特异性强、高效、条件温和、易于控制等优点而具有广阔的应用前景.本实验应用植物精提符合酶SPE-007转化升麻素苷来制备升麻素,此酶法转化率可达到98%以上,如此简便、经济的方法可为升麻素的工业化生产提供重要参考.