背景:达米恩基金会孟加拉国结核病(TB)控制项目.目的:比较蓝墨水、高锰酸钾和美蓝用于透射发光二极管(LED)TB荧光显微镜(FM)的背景染色.设计:将萋-尼染色(Z-N)抗酸杆菌阳性或阴性的痰标本制成一式三份的金胺染色涂片,使用上述一种背景染液染色,而后选用LED FM进行盲法镜检.对与萋-尼染色结果不一致的涂片,由参比实验室在金胺复染前后进行复检,金胺复染结果作为金标准.结果:在评价的1977份涂片中,991(50.1％)来自Z-N阳性标本.其中用蓝墨水、高锰酸钾和美蓝进行背景染色的真阳性分别为919、942和958张涂片,而假阳性数分别为12、12和16张涂片.美蓝复染的敏感性(95.6％,95％CI:94.2～96.8)要高于蓝墨水(92.7％,95％CI: 90.9～94.3,P＜0.01)或高锰酸钾(93.6％,95％CI:91.9～95.0,P＜0.05).在180例不一致涂片中,经过或未经复染,85％的涂片未找到抗酸杆菌,15％的涂片未找到抗酸杆菌.结论:在使用透射蓝光激发的LED荧光显微镜观察时,美蓝复染至少与高锰酸钾效果相当,而比蓝墨水更便宜.对金胺染色涂片进行室间质量评估盲法复检时,需要在第一次复检前对所有涂片进行复染.

目的:研究日本新近研制的第三代3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA, HMG-CoA)还原酶抑制剂匹伐他汀(pitavastatin, NK-104)对人肝癌细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性的影响.方法:采用细胞培养技术,以肝癌细胞系HepG 2为靶细胞,以不同浓度的药物处理细胞48 h后,利用WST-8法测定NK-104对细胞增殖的影响;利用荧光染料Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察细胞核碎片;以流式细胞仪分析细胞周期的变化;采用半胱氨酸蛋白酶3比色法检测caspase-3活性.结果:NK-104(10 μmol/L)对HepG 2细胞有明显抑制作用,可诱导HepG 2细胞凋亡,并能增强caspase-3基因的活性.结论:NK-104能够诱导HepG 2细胞凋亡,其机制与caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关.

目的 探讨亚砷酸对人肝癌细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3活性的影响.方法 采用细胞培养技术,以肝癌细胞系SMMC7721为靶细胞,以不同浓度的药物处理细胞72h后,利用WST-8法测定亚砷酸对细胞增殖的影响;利用荧光染料Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察细胞核碎片;以流式细胞仪分析细胞周期的变化;采用Caspase比色法检测Caspase-3活性.结果 亚砷酸(10 μmol/L)对SMMC7721细胞有明显抑制作用,可诱导SMMC7721细胞凋亡,并能增强Caspase-3基因的活性.结论 亚砷酸能够诱导SMMC7721细胞凋亡,其机制与Caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关.

CSP(cryptosporidium)是一种新进被人们引起重视的腹泻的重要病原之一.1970年Tyzz er在无症状的实验小鼠胃组织切片时发现了大量的隐孢子虫体.1976年由Nim 和Meisel等在美国首先发现.1981年最早从动物体内检查到抗体.目前检查方法较多如金胺-酚染色法用荧光显微镜检查;PCR检查.由于条件受限,一些检查方法不适合一般医疗单位的使用.我们用高倍镜直接观察发现"折光性弱的圆形体”后用改良抗酸染色二步法确诊,取得了较好的效果.

目的:探讨冷冻保存对人始基卵泡中颗粒细胞的形态及存活率的影响.方法:程序冷冻法保存人卵巢组织,采用常规组织学检测冷冻前后卵泡中颗粒细胞形态,并采用胶原酶消化联合镜下机械分离卵巢组织中的始基卵泡,采用双荧光标记,检测冷冻前后人卵巢组织分离始基卵泡中颗粒细胞的存活比例.结果:形态学检测发现,冷冻前卵巢组织中颗粒细胞发生损伤的始基卵泡占12.4%,卵母细胞损伤20.6%;冷冻后两者的比例分别为23.3%与24.4%.荧光标记的冷冻前卵巢组织中颗粒细胞存活的始基卵泡占72.7%,＜50%颗粒细胞存活的卵泡仅占3.6%,卵母细胞存活率为85.5%;冷冻组中颗粒细胞存活的始基卵泡占79.5%,＜50%颗粒细胞存活的卵泡仅占2.5%,卵母细胞存活率达86.1%.结论:冷冻复温的过程主要破坏卵泡中的颗粒细胞,而对卵母细胞的损伤很小.

目的 评价UF-50尿沉渣分析仪与光学显微镜进行血尿来源比较的分析性能.方法 选取肾病内科住院血尿患者103例,分别用UF-50尿沉渣分析仪与光学显微镜检查分析尿液中红细胞.结果 对于血尿来源,UF-50尿沉渣分析仪检查的敏感性(99.9%)高于光学显微镜检查的敏感性(86.8%),差异有统计学意义(P<0.05);而光学显微镜检查的特异性(70.6%)高于UF-50尿沉渣分析仪检查(49.4%),差异也有统计学意义(P<0.05).结论 UF-50尿沉渣分析仪与光学显微镜结合使用是鉴别血尿来源的较好策略.

目的：检测人源性细胞株DNA及人和黑猩猩外周血单核细胞(PBMC)DNA中是否存在与GBV-C基因组同源的核苷酸序列.方法：用PCR模板制备试剂盒提取MT2和HeLa细胞DNA及6例人和1例黑猩猩PBMC DNA，DNA经DNase的RNase消化后再用苯酚-氯仿提取.直接以上述DNA为模板，用GBV-C 5＇-NCR和NS3区引物进行套式PCR(dPCR)扩增.dPCR产物进行核苷酸序列分析，并用引物介导原位扩增(PRINS)DNA序列特异荧光标记技术确定扩增片段在染色体上的位置.结果：从MT2和HeLa细胞DNA及4例人PBMC DNA标本中获得GBV-C 5＇-NCR引物扩增片段.从MT2和HeLa细胞DNA及5例人和1例黑猩猩PBMC DNA标本中获得NS3区引物扩增片段.这些扩增产物的核苷酸序列与GBV-C基因组同源性为73.80％-79.15％.PRINS检测结果显示dPCR阳性的PBMC及其染色体上有荧光着色.结论：MT2和HeLa细胞DNA及人和黑猩猩PBMC DNA中存在与GBV-C 5＇-PCR和/或NS3区同源性较高的核苷酸序列，这些序列位于dPCR阳性的PBMC染色体上.

目的：研究莨菪亭对人前列腺癌细胞PC3增殖的作用和莨菪亭是否能引起PC3细胞的凋亡.方法：用细胞生长曲线，MTT试验和酸性磷酸酶(ACP)活性来测定细胞增殖，考马斯亮蓝法测细胞内蛋白质的含量，光镜、透射电镜和荧光显微镜观察莨菪亭引起的形态学变化.用荧光显微镜和流式细胞仪确定凋亡率和细胞的周期分布.结果：莨菪亭对PC3，PAA和Hela细胞的IC50分别为(157±25)，(154±51)和(294±100)mg/L，莨菪亭时间和浓度依赖性地抑制PC3细胞的增殖，并引起细胞内蛋白质含量减少和ACP活性降低.经莨菪亭处理后，在光镜、透射电镜和荧光显微镜下可观察到莨菪亭引起的典型的凋亡形态学变化，流式细胞仪测定显示经莨菪亭0，100，200和400 mg/L处理后PC3细胞的凋亡率分别为0.3％，2.1％，9.3％和35％，G2期细胞显著减少.结论：莨菪亭抑制PC3细胞增殖且可引起PC3细胞的凋亡.