目的:检测miR-223和HLA-B27在强直性脊柱炎(AS)患者外周血中的表达,探讨其与AS的相关性.方法:将收集的AS患者80例设为AS组;将64例健康者设为对照组.采用RT-PCR检测两组研究对象外周血中miR-223的表达;采用流式细胞术检测HLA-B27的表达,并进行相关分析.结果:AS组患者外周血中的miR-223、HLA-B27的表达显著高于对照组;不同疾病期miR-223、HLA-B27的表达存在差异(P<0.05).miR-223和HLA-B27呈显著正相关性(r=0.939).ROC分析显示miR-223曲线下面积为0.960.结论:AS患者外周血miR-223、HLA-B27高表达,与其疾病活动度相关,两者之间呈正相关性.外周血中miR-223的表达水平可以作为AS患者诊断的参考指标.
Objective:The epithelial-mesenchymal transition ( EMT) is an important factor in the invasion and metastasis of gastric cancer, and increasing evidences have demonstrated that Sp1 play critical roles in EMT of some cancer. However, few studies indicated whether Sp1 is involved in the EMT of gastric cancer, whether abnor-mal expression of Sp1 in gastric cancer EMT is regulated in apost-transcriptional manner, and whether miRNAs are key players in this regulation. The purpose of this study is to identify miRNAs targeting Sp1 and determine theirex-pression and function in gastric cancer. Methods and Results:we examined the expression of Sp1 in gastric canc-ers, their liver metastases and para-carcinoma tissues to determine the relationship between Sp1 expression and metastasis. Quantification of Sp1 mRNA and protein levels revealed that abnormal Sp1 expression in gastric cancer and metastatic tissues is attributed toalterations in post-transcriptional regulation. We next investigated the mecha-nism by which miRNA regulates Sp1 . Using bioinformatics we identified a putative miRNA-223 target site in the 3'-UTR of the SP1 gene. This target site was validated using aluciferase reporter system and miRNA-223 expression was found to negatively correlate with Sp1 protein levels. A TGF-beta1 -dependent model of EMT was established for gastric cancer cell lines and used in conjunction with miRNA-223 and Sp1 over expression studies to determine the role of miRNA-223 in gastric cancer cell proliferation, apoptosis and invasion. The expression of EMT-associ-ated proteins was analyzed in parallel to investigate at the molecular level the role of miRNA-223/Sp1/EMT in the regulation of gastric cancer invasion. Conclusions: We demonstrate that miRNA-223, through suppression of Sp1 expression, inhibits the proliferation and invasion of tumor cells and promotes apoptosis, and thereby suppresses the EMT-associated metastasis of cancer cells.
目的 研究褪黑素对miRNA-223表达的影响及对脓毒症小鼠心肌损伤保护的作用机制.方法 取48只健康雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为假伤组、生理盐水组及褪黑素治疗组,每组16只.生理盐水组和褪黑素治疗组采用腹腔注射内毒素制备脓毒症模型,褪黑素治疗组于建模前30 min、建模时、伤后4 h分3次注射褪黑素,生理盐水组和假伤组在褪黑素治疗组相应给药时间点注射等量生理盐水.内毒素处理24 h后,3组均取8只小鼠,收集血液,检测血清中白介素(IL)-1β、IL-6含量,蛋白免疫印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;48 h后处死其余小鼠,收集心肌组织,检测miRNA-223含量.结果 褪黑素治疗组、生理盐水组血清IL-1β、IL-6水平高于假伤组,褪黑素治疗组低于生理盐水组(P<0.01).褪黑素治疗组、生理盐水组Bcl-2表达水平低于假伤组,褪黑素治疗组高于生理盐水组(P<0.01);褪黑素治疗组、生理盐水组Bax蛋白表达水平高于假伤组,褪黑素治疗组低于生理盐水组(P<0.01).与假伤组比较,生理盐水组心肌纤维明显肿胀,大量炎性细胞浸润,褪黑素治疗组心肌结构则较生理盐水组明显改善.褪黑素治疗组、生理盐水组心肌组织miRNA-223水平均低于假伤组,褪黑素治疗组高于生理盐水组(P<0.01).结论 褪黑素可能通过上调心肌组织miRNA-223的表达,减少IL-1β、IL-6等炎性因子的释放,抑制炎性反应,从而减少心肌组织的凋亡,保护心肌组织.
目的:探讨miRNA-223、 miRNA-181 a在急性白血病( AL)中的表达情况及其在AL临床预后中的意义。方法采用实时定量逆转录PCR (RT-PCR)方法检测42例AL患者miRNA-223、 miRNA-181a的表达,其中急性髓细胞白血病( AML)患者35例,急性淋巴细胞白血病( ALL)患者7例,以同期住院的5例非白血病患者中miRNA-223、 miRNA-181a的表达作为参照物,采用单因素方差分析(ANOVA)中的LSD法对多组样本均数间的比较进行分析。结果采集的样本中符合标准的共39例(其中AML 29例, ALL 6例,正常对照组4例);29例AML中miRNA-223、 miRNA-181a相对表达水平的均数分别为6.65±1.29、9.7±2.20,6例ALL中miRNA-223、 miRNA-181a相对表达水平的均数分别为4.76±0.76、10.06±2.47; miRNA-223在AML、 ALL中的表达水平均低于正常对照组( P<0.01), miRNA-223在AML中的表达水平明显高于ALL ( P<0.01), miRNA-181 a在AML、 ALL中的表达水平均高于正常对照组( P<0.01), miRNA-181a在AML、 ALL中的表达差异无统计学意义; miRNA-181a在预后好分组中的表达水平明显高于预后中等组,差异有统计学意义( P<0.05),与APL组差异无统计学意义;此外, miRNA-223、 miRNA-181 a在初治、复发组及不同年龄及性别间无明显差异。结论 miRNA-223、 miRNA-181 a的表达与AL关系密切相关,可作为AL诊断的新标准,尤其在AML、ALL鉴别诊断中具有重要意义; miRNA-181 a可能在AML预后中具有重要价值,与患者临床疗效和长期生存有着直接关系; miRNA-223、 miRNA-181 a的表达与年龄、性别、初治与复发无关。
目的:探明SUFU、GLI1基因在正常胰腺组织以及胰腺癌和癌旁组织中的mRNA表达,分析miR-223的表达与GLI1、SUFU基因转录之间的关系,以及SUFU、GLI1基因在胰腺癌发病过程中的作用.方法:对正常胰腺组织以及胰腺癌和癌旁组织进行总RNA的提取,采用Real-time PCR方法,检测SUFU、GLI1基因的转录情况,对SUFU、GLI1的mRNA的表达量与miRNA-223的表达量进行相关性分析.结果:胰腺癌组织中GLI1 mRNA的表达量为4..79 (1.19,9.89),胰腺癌癌旁组织中的表达量为2.01(0.70,5.76)(P<0.05).胰腺癌组织中SUFU mRNA表达量为1.34 (0.91,2.31),胰腺癌癌旁组织的表达量为1.51(1.23,2.56)(P>0.05),胰腺癌癌旁组织中GLI1 mRNA的表达量与miR-223在胰腺癌癌旁组织中的表达量之间存在一定程度的相关性(P<0.05).结论:GLI1mRNA参与了胰腺癌的发生,而SUFU mRNA与胰腺癌发生关系不大.GLI1基因及miR-223在胰腺癌的发生中可能起到一定的协同作用.
目的:探讨胃癌患者血清中miRNA‐223的表达水平及其诊断价值。方法:采用实时定量PCR法检测50例胃癌患者和50名健康对照者血清miRNA‐223的表达量,分析miRNA‐223与胃癌临床病理参数的关系。构建受试者工作特征(ROC)曲线,比较miRNA‐223与癌胚抗原(CEA)的诊断效能。结果:胃癌患者血清miRNA‐223水平高于健康对照组(P<0.05)。ROC曲线显示,miRNA‐223诊断胃癌的曲线下面积(AUC)达0.636(95% CI 0.526~0.746),灵敏度、特异度分别为48%、82%;miRNA‐223联合CEA诊断胃癌的 AUC达0.769(95% CI 0.675~0.862),灵敏度、特异度分别为70%、78%。结论:miRNA‐223联合CEA有助于胃癌的诊断。
目的:分析所有 miR-223基因家族成员的序列特征,并对 miR-223靶基因进行预测,然后分析 miR-223靶基因的生物学功能。方法:利用 Clustal X 1.83软件分析 miR-223基 因 序 列 特 征,MEGA 5.0软件分析进化关系,再运用 Tar-getScan、PicTar 和 miRDB 进行靶基因预测,最后 GO 和 KEGG 进行功能分析。结果:在 miRBase 数据中获得 miRNA-223基因家族成员的序列27条,绝大部分位于基因间隔区,少数成员的基因位置未知。大部分定位于 X 染色体,部分成员位于常染色体。miRNA-223成熟序列长度在20-23nt 之间,同源性较高。系统进化树分析表明,miRNA-223基因家族成员分为三支。预测获得人类 miRNA-223的可能具有27个靶基因,它们主要与信号转导、转录调控以及细胞生长发育等密切相关。结论:本研究结果不仅有利于理解 miR-223基因家族的生物学功能,也可为后续研究提供理论依据。