应用自制的两种抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)单克隆抗体,分别包被硝酸纤维膜及制备胶体金结合物,建立了检测HCG的滴金免疫测定法.结果表明,本法简便,快速,灵敏度高(最小抗原检测量为50mIU/L),特异性好,与高浓度的LH、FSH、TSH均无交叉反应,临床检验217例样品,与ELISA法对比测定的符合率为100%.
弓形虫病是一种人兽共患寄生虫病,如孕妇感染弓形虫后,可通过胎盘垂直传播给胎儿,引起胎儿严重的神经系统损害而致畸形或智力障碍.由于其临床症状缺乏特异性,在诊断上发现病原体很困难,所以主要依靠血清学方法检测特异性抗体.目前,已建立补体结合试验、间接免疫荧光试验、间接血凝试验、ELISA和RIA等多种方法.这些方法或由于特异性、敏感性不够高,或由于操作繁琐,需一定设备条件等而使应用受到限制.我们以胶体金-SPA作为标记物,建立了一种检测血清弓形虫抗体的快速、简便的滴金免疫检测法.
滴金免疫测定法(dotimmunogo1dfiltration assay,DIGFA)是近年来发展起来的一种以胶体金为标记物的快速斑点免疫结合试验[1],抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应.该法具有与一般酶联免疫吸附法(ELISA)相同的特异性和灵敏性,但操作更简便,不需洗涤,快速,斑点色泽鲜艳,结果易于判断以及不需特殊仪器设备等优点.
金标法即滴金免疫测定法(DIGFA)检测日本血吸虫抗体已在许多血吸虫病流行区用于疫情监测[1-3].为观察DIGFA在云南血吸虫病不同类型流行区的现场应用价值,我们比较了分别由浙江省医学科学院寄生虫病研究所和深圳康百得生物科技公司生产的血吸虫抗体DIGFA试剂盒的检测结果,现报告如下.
1 材料和方法1.1 材料血吸虫滴金免疫测定法(DIGFA)由浙江省医科院寄研所提供;B超由浦口卫生院B超室检查;其它均由市疾控中心完成.
滴金免疫测定法(DIGFA)检测血吸虫抗体与ELISA一样具有高度敏感性和特异性[1],并经血吸虫病传播阻断地区人群2 097份血清抗体的检测,证明该法适用于血清流行病学调查[2].为便于该法的推广应用,我们将有关材料和试剂制成试剂盒,进一步检测血吸虫病传播阻断地区人群及外来人员的血清抗体,以观察该试剂盒在现场的应用价值.
目的建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法.方法应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb),一株滴于硝酸纤维素膜上,另一株与胶体金结合为探针,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原(CA)的滴金免疫测定法,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应,10min内即可用肉眼观察结果.对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测,确定本法的最低抗原检出量(0.45ng/ml).将本法与ELISA作了比较.结果对78例囊虫病患者血清进行检测,循环抗原阳性率为87.18%.其中活动型脑囊虫病患者52例,循环抗原阳性率为98.08%;非活动型脑囊虫病患者20例,循环抗原阳性率为65.00%;单纯皮肌型囊虫病患者6例,循环抗原阳性率为66.67% .40份健康人血清仅有1例(2.50%)出现假阳性,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及23例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应.该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为0.45ng/ml.本法与ELISA的符合率为98.19% .结论 DIGFA简便、快速,结果客观,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高,特异性强,值得进一步推广应用.
目的:建立检测血清中弓形虫IgG抗体的简便、快速的滴金免疫测定法。方法:将弓形虫抗原包被于硝酸纤维素膜上,通过胶体金-SPA直接显色,阳性者在膜上出现红色斑点。 结果:用该法与间接ELISA法平行对比检测经间接血凝法确定的11份阳性血清和30份阴性健康人血清,结果有良好的一致性,符合率为90.9%。结论:滴金免疫测定法检测血清中弓形虫抗体简便、快速、敏感,无需特殊仪器设备,适于基层应用。