近年来，作为新型肿瘤免疫治疗技术，嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR）T细胞在恶性肿瘤的治疗中取得了很好的成果，为部分晚期患者带来了康复的希望。CAR是利用基因工程技术将能够与肿瘤抗原结合的受体部分与胞内的信号转导部分相结合而形成的一种新型受体，经CAR修饰的T细胞可通过非MHC限制性的方式杀伤肿瘤细胞。本文就近年来CAR-T疗法的研究进展及其在恶性肿瘤临床治疗的应用进行综述。

以嵌合型抗原受体(CAR)为基础的细胞治疗近年成为肿瘤生物治疗领域最亮丽的明星.尤其是靶向CD19分子的CAR-T细胞在B淋巴细胞恶性肿瘤的临床治疗中取得了良好的疗效.本文通过总结国内外CAR-T细胞的临床试验数据,对其临床疗效和潜在的不良反应进行统计分析,并就CAR-T细胞的发生、临床应用及存在的问题进行阐述.

嵌合抗原受体修饰T细胞(CAR-T)是目前恶性肿瘤免疫治疗的一种新方法.CAR-T细胞对肿瘤的杀伤不依赖主要组织相容性复合体(MHC),并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境和突破宿主免疫耐受状态,因此,CAR-T细胞在治疗肿瘤方面具有独特的优势.CAR-T细胞的构建和选择合适的靶分子是CAR-T细胞免疫治疗的两个关键的问题,我们在文中将围绕这两个问题做一综述.

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是在B淋巴细胞分化为浆细胞过程中因遗传基因发生突变所致的血液系统恶性肿瘤,化疗是目前主要治疗的手段;随着蛋白酶体抑制剂等药物的开发,患者的总体生存率得到了提高,但耐药等因素仍然会导致治疗的失败.嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰的T淋巴细胞治疗是近5年来肿瘤过继免疫治疗的新方法,通过基因修饰的手段,使T细胞能够能特异性识别靶抗原,并以非组织相容性抗原(major histocompatibility complex,MHC)限制性的方式杀伤靶细胞,从而产生特异性的杀伤作用.目前,CAR-T治疗越来越被人们所关注,尤其在B系来源的白血病和淋巴瘤中取得了惊人的成绩.然而,就多发性骨髓瘤的CAR技术治疗而言,未见系统的文献复习.因此,本文就可查阅到的以不同靶点的CAR技术在多发性骨髓瘤体内及体外实验中所获得的研究成果作一综述.

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞治疗技术经过近30年的发展,逐渐成为治疗血液肿瘤的新趋势.随着基因工程技术的不断发展,CAR-T技术已经经历了4代革新.CAR-T结构从单一信号分子发展到2个及2个以上共刺激分子,再到编码CAR基因或启动子,CAR-T技术发展不断成熟.CAR-T能特异识别肿瘤抗原,不受主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)限制性的影响,在治疗血液肿瘤领域取得了突破性的成果.本文就CAR-T的历史、结构和作用机理、以及在急性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病、慢性髓系白血病、多发性骨髓瘤等血液肿瘤临床治疗中的研究现状和面临的挑战作一综述.

应用嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptorT cell,CAR T)治疗急性和慢性淋巴细胞白血病,在近期已取得了新进展.CAR T细胞是通过将T细胞受体基因和抗CD19抗体基因嵌合,转柒至T细胞,在体外扩增以后输注给患者来治疗白血病的新型免疫治疗.经过基因改造后的CAR T细胞的表面具有特异性位点,可以识别淋巴细胞白血病中B细胞表面的CD19抗原.CD19抗原的持续刺激可使CAR T细胞不断增殖与活化,CAR T在患者体内可以增殖1000倍,有效杀伤急性和慢性淋巴细胞白血病细胞.本文就CAR T细胞及其对急性和慢性淋巴细胞白血病的疗效进行综述.

嵌合抗原受体(CAR)是单链抗体的可变区和T细胞信号分子的融合蛋白,它使T细胞可以通过非MHC限制性的方式识别特异性抗原,发挥杀伤作用.目前,CAR的信号域已从第一代的单一信号分子发展为包含CD28、4-1BB等共刺激分子的多信号结构域(第二、三代),在体内的存在时间及杀伤能力明显增强.利用靶向CD19和CD20的CAR修饰的T细胞进行过继输注,治疗血液系统恶性肿瘤是目前临床研究的热点.临床试验表明第二代CAR的抗肿瘤能力较第一代CAR明显增强,对于复发及难治性B系肿瘤有一定的疗效.同时,CAR技术也正研究用于骨髓移植后的过继免疫治疗等领域.在治疗安全性方面,目前临床试验中大部分患者对CAR治疗耐受性良好,但学者们对CAR可能引起插入突变、脱靶效应和炎症反应等不良反应也不无忧虑.本文就CAR技术在血液系统恶性肿瘤免疫治疗中的应用及安全性评价作一综述.

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种合成跨膜蛋白,通过抗肿瘤细胞上的特异性或相关性抗原来重新定向被修饰的细胞.CAR修饰的T/NK细胞,特别是CAR-T细胞是近年来迅速发展的肿瘤过继免疫治疗新手段,它赋予T/NK细胞靶向杀伤活性,并可克服肿瘤局部免疫抑制微环境和打破宿主免疫耐受状态.CAR将识别肿瘤相关抗原的单链抗体和T/NK细胞的活化基序相结合,通过基因转导赋予T/NK细胞肿瘤靶向性、更强的杀伤活性和持久的生命力.本文就CAR发展、CAR-T和CAR-NK细胞的比较、MM细胞的表面标记和CAR在MM中的应用及CAR-T/NK细胞的前景进行综述.

目的:通过建立CAR(CD138-CD28-CD3ζ)-NK细胞,探讨CAR(CD138-CD28-CD3ζ)-NK细胞对多发性骨髓瘤的抗肿瘤作用.方法:把抗CD138scFv-CD28-CD3连接到pcDNA3.1质粒,使用三质粒慢病毒包装系统转染293T细胞,收集病毒后感染NK92MI细胞系,应用嘌呤霉素筛选阳性细胞株;通过RT-PCR及West-ern blot检测CAR在NK92MI细胞系的表达,流式细胞术检测NK92MI细胞分泌细胞因子cd107a的能力.结果:经过基因工程技术,体外构建了CAR基因片段,基因测序验证基因序列正确.通过病毒包装技术,获得表达该片段的病毒株.经过病毒转染实验,获得表达CAR融合蛋白的稳转NK细胞株.PCR及Western blot证实,CAR融合蛋白在NK细胞表达.细胞杀伤实验证实CARNK细胞分泌细胞因子cd107a的能力明显优于对照组,具有明显的杀伤多发性骨髓瘤细胞的效应.结论:CAR能在体外构建并在NK92细胞表面表达,CARNK细胞能杀伤表达CD138抗原的多发性骨髓瘤细胞株,从而发挥抗骨髓瘤效应.

目的 构建表达抗 CD19 分子的嵌合抗原受体,制备抗CD19 CAR-T 细胞,研究其对 CD19 表型细胞的特异性识别和杀伤效果.方法 通过分子克隆方法,构建能够自剪切 EGFP 荧光报告的抗 CD19 CAR 分子,将其重组到慢病毒载体中并包装获得慢病毒.通过慢病毒递送的方式,将抗 CD19 CAR 过表达于 primary-T 细胞,流式细胞术分析确认表达后,通过ELISA 检测 CAR-T 细胞 IL-2 分泌情况,最后用 LDH 释放法评价靶向杀伤作用.结果 成功获得抗 CD19 CAR 的慢病毒递送载体;流式细胞术表明 CAR 分子在 T 细胞表面高效稳定表达;ELISA结果显示 CAR-T 细胞在靶细胞刺激下 IL-2 分泌水平显著升高(P < 0.01);LDH 结果显示 CAR-T 细胞特异性杀伤 CD19 表型细胞,且杀伤效果在 E:T = 10:1 时达到50% 以上,显著高于对照组(P < 0.05).结论 成功获取了具有靶向 CD19 表型细胞的 CAR-T 细胞,能高效特异性杀伤肿瘤细胞.

以嵌合抗原受体（CAR）为基础的细胞免疫治疗目前成为治疗恶性肿瘤的一种新兴形式。CAR技术的应用在以下几方面受到密切关注：选择合适的目标抗原；甄选高效、安全的基因转导方法；优化信号分子；筛选最具潜质的免疫细胞。随着研究的深入和技术的提高，相信CAR技术会给肿瘤患者带来福音。

嵌合抗原受体（CAR）为基础的免疫治疗，发展经历了近25年，它已经从一个新兴的复杂的技术转变成为恶性肿瘤治疗的一种新策略。随着重组 DNA 技术的不断发展以及对信号传导通路的不断研究深入，CAR 技术也在不断革新并开始为临床服务。而CAR疗法以其在血液肿瘤的中独特优势在治疗中不断取得突破，见证了CAR技术成熟的过程。本文主要回顾在血液肿瘤研究中CAR技术的革新、应用现状和前景。

胶质母细胞瘤（GBM）是常见的最具侵袭性的脑部恶性肿瘤之一，尽管手术、放疗和化疗取得了进步，GBM患者预后仍然较差，寻求特异性强、靶向性高的治疗方法势在必行。免疫治疗通过特异性识别和杀伤肿瘤细胞，为 GBM 治疗开辟了新道路，其中以疫苗、抗体和细胞为基础的临床研究取得令人鼓舞的成果，免疫治疗有望突破传统治疗策略的藩篱，有效杀灭肿瘤细胞，赋予患者新的希望。本综述回顾了当前GBM的免疫治疗方法及相关研究。

嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫疗法是过继性细胞免疫疗法中最具有研究前景的方法,它是利用基因技术,在T细胞内导入一个可以将CAR表达于其表面的基因,并使T细胞发挥作用,克服肿瘤局部免疫抑制微环境、打破宿主免疫耐受状态,靶向杀伤肿瘤细胞.本综述主要探讨CAR-T细胞免疫疗法及其原理、临床应用、存在的安全性问题和应对措施.

自然杀伤(NK)细胞是一类具有高抗肿瘤、抗病毒活性的固有免疫细胞,可以在无抗原预先致敏的情况下杀伤肿瘤细胞.目前,恶性肿瘤的治疗依然是世界性难题,亟待研发更加有效的肿瘤治疗方法.近年来,肿瘤的免疫治疗成为抗肿瘤研究的热点之一,其中,以嵌合抗原受体(CAR)修饰的NK细胞为基础的CAR-NK免疫治疗技术,成为一种新型抗肿瘤免疫方法,在临床前研究中对实体瘤的治疗效果显著,具有较好的肿瘤治疗前景;同时,将CAR-NK细胞与其他抗肿瘤疗法联合应用,也是未来肿瘤治疗的一个研究方向.

目的 嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T)是从患者的血液或肿瘤组织中提取出T淋巴细胞,通过基因工程技术,采用特异性CAR基因转染后,进行体外培养增殖,进而产生一种抗肿瘤细胞.本研究总结关于CAR-T技术与血液恶性肿瘤研究现状,探讨其对血液肿瘤治疗的效果.方法 以“嵌合抗原受体型T细胞、嵌合抗原受体型T细胞与肿瘤生物治疗、嵌合抗原受体型T细胞与血液肿瘤”为关键词,应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,检索2000-01-2016-03相关文献,共检索到文献520篇.以“CAR-T的生物合成、CAR-T的作用机制、CAR-T细胞在血液肿瘤中的治疗以及CAR-T细胞临床应用研究方向”为纳入标准,符合条件的文献共有42篇.结果 CAR-T细胞是通过基因修饰的方法获得的针对肿瘤细胞表面特定抗原的特异性T细胞,CAR-T细胞具有强大的抗肿瘤效果,可以在体内特异性识别并杀死肿瘤细胞.其对肿瘤细胞的识别作用是由CAR结构所决定.目前,CAR-T细胞技术常用于治疗血液肿瘤,尤其对于B细胞恶性肿瘤的治疗展现出良好的效果,并且对Ph+的高危患者和造血干细胞移植后复发的患者同样有效.结论 CAR-T细胞可能成为治疗血液恶性肿瘤的一种重要手段.

嵌合抗原受体修饰的T细胞(CAR-T细胞)是将单链抗体技术和T细胞活化基序结合应用的一种新的免疫治疗技术,具有特异、持久的肿瘤杀伤效应,在B淋巴细胞白血病、B淋巴瘤及实体瘤的临床试验中取得了令人震惊的效果,但也存在着脱靶效应、细胞因子释放综合征、移植物抗宿主病等潜在的风险.文章就CAR-T细胞原理、优势、临床应用等方面进行简要综述.

目的 构建具有靶向功能下咽鳞状细胞癌Fadu细胞系,EGFR-CART细胞并进行验证,为CART细胞技术在下咽鳞状细胞癌治疗应用临床前基础进行探索.方法 通过慢病毒转染构建EGFR-CART细胞及CART-对照细胞,FACS荧光检测CART细胞上EGFR抗体的表达,验证 Fadu细胞系及HCT-116细胞系中EGFR的表达.结果 成功构建了EGFR-CART细胞及CART-对照细胞,感染效率约为67％,二者在细胞亚群的分布上没有明显区别.靶细胞功能验证发现HCT-116中EGFR低表达,Fadu中EGFR高表达,确定HCT-116作为EGFR-CART的非靶细胞,Fadu作为靶细胞.结论 本研究成功制备并验证了具有靶向功能的下咽鳞状细胞癌Fadu细胞系的EGFR-CART细胞,为CART技术在下咽癌治疗中的应用打下了前期基础.

目的 制备靶向潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞,观察LMP2A CAR-T细胞体内外对鼻咽癌细胞的杀伤作用.方法 2016年9月至2017年12月,本研究以基因工程技术构建抗LMP2A慢病毒表达载体,测序鉴定并通过Western blot法验证抗LMP2A CAR在293T细胞中的表达;通过质粒包装体系制备LMP2A CAR慢病毒,并感染人T细胞,制备LMP2A CAR-T细胞;CCK-8法检测LMP2A CAR-T细胞对鼻咽癌细胞的杀伤作用.酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LMP2A抗原激活后的LMP2A CAR-T细胞白细胞介素(IL)-2与干扰素(IFN)-γ的分泌水平.体内实验观察LMP2A CAR-T细胞对鼻咽癌移植瘤的抑瘤作用.SPSS 21.0统计学软件用于统计分析.结果 PCR结果显示抗LMP2 A CAR片段大小约为1500 bp,与理论值相一致,测序显示序列正确;Western blot结果显示抗LMP2A慢病毒表达载体能在293T细胞中表达;CCK-8法结果发现在效靶比为20:1、10:1与5:1时,LMP2A CAR-T细胞对LV-LMP2A-CNE1细胞的杀伤率分别为(72.11±9.75)％、(54.65±5.42)％与(36.68±3.80)％,与CD19 CAR-T细胞、T细胞相比差异有统计学意义(P<0.05),而对CNE1细胞的杀伤作用与CD19 CAR-T细胞和T细胞相比差异无统计学意义;ELISA法结果发现LMP2A CAR-T细胞与LV-LMP2A-CNE1细胞共培养上清中IL-2与IFN-γ的含量,显著高于与CNE1细胞共培养上清,差异具有统计学意义(P<0.05);体内实验中LMP2A CAR-T细胞组瘤体体积为(80.3±10.0)mm3,显著小于各对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 成功制备的LMP2A CAR-T细胞对LMP2A阳性的鼻咽癌细胞具有显著靶向杀伤效应.

近年来,嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)在肿瘤治疗领域表现出前所未有的疗效,对恶性B细胞肿瘤更是颠覆性突破.然而,临床研究发现,CAR-T输入体内后,经常因活性过度或活性失控而导致严重的毒副作用,如细胞因子风暴、靶点毒性和肿瘤溶解征等.构建CAR-T所采用的病毒载体也可能因基因组整合引起插入突变毒性.如何将CAR-T转化为安全有效的肿瘤治疗生物制品,且适用于更多类型的肿瘤,仍面临众多挑战.针对CAR-T治疗潜在的毒性,本文讨论了一系列可行的技术措施,包括使用自杀基因、组合靶向多抗原识别、正调控系统和非病毒载体等,希望为解决CAR-T制品的临床安全问题提供切实保障.

目的 研究双嵌合抗原受体T细胞(BiCAR-T)对人脑胶质瘤细胞系U87的体外细胞毒活性,及其对BALB/c nude裸小鼠恶性胶质瘤模型的体内抗肿瘤作用.方法 用BALB/c Nude裸小鼠U87细胞皮下肿瘤模型和颅内肿瘤模型观察BiCAR-T细胞体内抑瘤作用.皮下肿瘤模型实验分为对照组、模型组和实验组,观察各组小鼠的肿瘤体积生长情况,取肿瘤组织进行病理学检测.颅内肿瘤模型实验分为对照组、模型组和实验组,取肿瘤组织进行病理学检测,用免疫组织化学法检测Cyclin D1的表达情况.结果 流式细胞术检测结果表明,BiCAR-T细胞CAR的表达率超过50％.体外实验中,效靶比为5∶1,10∶1,20∶1时:实验组细胞对U87细胞的杀伤率为(21.21±1.11)％,(42.45±2.52)％,(62.34±4.17)％,对照组细胞对U87细胞的杀伤率为(14.15±0.88)％,(22.31±1.21)％,(35.98±2.45)％;实验组IFN-γ水平为(403.36±25.98),(1756.29±103.36),(2784.52±190.13) pg·mL-1,对照组IFN-γ水平为(369.76±22.56),(1005.56±44.65),(1954.44±112.04) pg·mL-1,在效靶比为10∶1和20∶1时,2组间差异有统计学意义(P＜0.05).BiCAR-T细胞对BALB/c nude裸小鼠皮下恶性胶质瘤生长抑制率为45.80％,与模型组的100.00％比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).皮下肿瘤模型实验组与模型组相比,可见肿瘤细胞显著减少.颅内肿瘤模型实验组与模型组相比,肿瘤细胞显著减少,Cyclin D1表达下降.结论 BiCAR-T细胞是一种经基因工程修饰的高效靶向的免疫细胞,具有较强的体内外抑制恶性胶质瘤生长的作用.

嵌合抗原受体修饰淋巴细胞是过继免疫治疗的一种类型，其通过体外改造细胞表面受体，使淋巴细胞过表达，从而促进淋巴细胞的抗肿瘤活性。这种技术是目前恶性肿瘤免疫治疗领域中的新疗方法之一，在恶性血液病尤其是B细胞系统恶性血液病中治疗效果令人振奋。多发性骨髓瘤是血液系统第二常见恶性肿瘤，好发于老年人，目前仍无法治愈，研究者们一直在探索该病的免疫治疗。本文对近年来嵌合抗原受体修饰淋巴细胞技术的发展及其在多发性骨髓瘤中的应用进行综述。

随着肿瘤免疫学理论和技术的不断发展,人们对肿瘤的认识和治疗也迎来了新纪元.除了传统的手术、放疗和化疗以外,以嵌合抗原受体修饰的T细胞(CAR-T)为代表的过继性细胞免疫治疗已成为肿瘤研究和治疗的热点.该文主要综述了CAR-T的发展历程、在血液系统肿瘤以及实体瘤中的应用以及面临的挑战等,期望能为肿瘤的治疗带来新希望.

目的 探讨嵌合抗原受体(CAR)T细胞技术治疗儿童急性B淋巴细胞白nL病(B-ALL)的临床疗效和不良反应.方法 报道1例CAR-T细胞治疗儿童B-ALL异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后复发患者,并复习相关文献.结果 1例伴TEL-AML1融合基因阳性11岁B-ALL患儿,规律化疗后早期复发,于第2次完全缓解(CR)期给予allo-HSCT.治疗后骨髓微小残留病(MRD)反复阳性,化疗以及供者淋巴细胞输注(DLI)治疗无明显疗效,故给予供者来源的抗CD19的CAR-T细胞输注.该患儿经输注CAR-T细胞1×106/kg后骨髓MRD转阴,后又反复输注3次CAR-T细胞[(0.83～1.65)×106/kg],患儿持续无病生存达10个月,随后输注CAR-T细胞2次,监测外周血TEL-AML1融合基因拷贝持续升高,最终骨髓复发,因脑出血死亡.输注CAR-T细胞的主要不良反应为细胞因子释放综合征.结论 抗CD19的CAR-T细胞技术治疗复发B-ALL安全有效,为复发及难治性B-ALL患儿提供了新的治疗手段.

目的 探讨共刺激分子为4-1BB的二代CD19嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)对不同侵袭性淋巴瘤细胞的体内、体外杀伤活性以及CAR-T细胞在体内生存的时间.方法 采用慢病毒包装并感染T细胞的方法制备CD19 CAR-T细胞,采用CCK-8、ELISA和乳酸脱氢酶细胞毒性检测法检测CD 19 CAR-T细胞的增殖能力、炎症因子释放水平和对Raji(套细胞淋巴瘤细胞株)、Pfeiffer(弥漫大B细胞淋巴瘤细胞株)、EHEB(慢性淋巴细胞白血病细胞株)细胞的杀伤活性,采用流式细胞术分析CD19 CAR-T细胞治疗前后荷瘤裸鼠的肿瘤负荷和CAR-T细胞残留水平.结果 ①与二代CAR-T细胞比较,三代CAR-T细胞的体外(24、48 h)增殖能力(P值均＜0.05)、对瘤细胞的杀伤活性(P值均＜0.05)较强,差异有统计学意义;而炎症因子的释放水平差异无统计学意义(P值均＞0.05).②效靶比为4∶1且共培养48 h时,二代CD19 CAR-T细胞对Raji细胞[(72.36±2.98)％]、Pfeiffer细胞[(55.92±4.16)％]、EHEB细胞[(35.53±3.93)％]的杀伤活性从强到弱,差异有统计学意义(P=0.013).③裸鼠体内试验结果显示二代CAR-T细胞在EHEB荷瘤小鼠体内存活时间长于Raji荷瘤小鼠(P=0.046).结论 共刺激分子为4-1BB的二代CD 19 CAR-T细胞对惰性淋巴瘤细胞株的杀伤活性稍低于对侵袭性淋巴瘤细胞株,但在惰性淋巴瘤细胞株荷瘤小鼠体内存活时间更长,可能更适合惰性淋巴瘤的治疗.

目的 评估程序性细胞死亡受体1(PD-1)抑制剂Nivolumab对CD19-CAR-T细胞体外增殖和杀伤活性的影响.方法 收集5例外周血PD-1高表达恶性淋巴瘤患者的外周血T细胞制备CD 19-CAR-T细胞,在培养第8天加入终浓度分别为72、36、18 μg/ml的Nivolumab,同时设患者T细胞联合72 μg/ml Nivolumab及正常人CD19-CAR-T细胞为对照,采用CCK-8法、LDH细胞毒性检测、ELISA法比较各组的增殖活性、杀伤活性及炎症因子水平.结果 ①PD-1高表达患者CD 19-CAR-T细胞转染率与正常人接近[(32.80±7.22)％对(35.10±5.84)％,t=-0.554,P=0.593].②72μg/mlNivolumab联合CD19-CAR-T细胞不影响其增殖,但联合应用24、48 h对Pfeiffer细胞的杀伤率均优于单用患者CD 19-CAR-T细胞及患者来源T细胞+72 μg/ml的Nivolumab(P值均＜0.001),其中48 h时各组的杀伤率分别为(71.61±9.50)％、(6.77±1.26)％、(15.33±4.11)％.72、36 μg/ml Nivolumab联合来源CD19-CAR-T细胞对Pfeiffer细胞的杀伤率差异无统计学意义(P值分别为0.281、0.267),二者均高于患者来源CD19-CAR-T细胞+18 μg/ml Nivolumab组(P值均＜0.001).③不同剂量Nivolumab联合患者来源CD19-CAR-T细胞,不影响炎症因子IFN-γ、TNF-α水平(P值均＞0.05).结论 终浓度为36μg/ml的Nivolumab与CD19-CAR-T细胞联合应用,可在减轻药物毒副作用同时增强CD19-CAR-T细胞的杀伤活性.

过继性细胞免疫治疗( adoptive cellular immuno-therapy,ACI)是将体外培养、活化、基因修饰的自体、异体T细胞或NK细胞回输给患者,旨在利用这些体外“驯化”细胞所拥有的强大抗肿瘤或抗病毒活性来治疗疾病。对于肿瘤治疗来说, ACI的目标在于清除肿瘤细胞和阻止肿瘤复发。早在1985年,美国国立癌症研究院( national cancer institute,NCI)的Rosenberg等就报道了全球第一项ACI 疗法,他们采用淋巴因子激活的杀伤细胞( lymphokine-acti-vated killer cells,LAK)联合白介素( IL)-2治疗转移性肿瘤,开创了肿瘤ACI的先河[1]。时至今日,ACI的临床研究已经持续进行了近30年。随着嵌合抗原受体( chimeric antigen receptor,CAR)修饰T细胞(CAR-T)疗法的迅猛发展,ACI领域已经取得了突破性进展,今年7月美国FDA授予诺华与宾夕法尼亚大学合作开发的 CAR-T“药物”--CTL019以“突破性疗法认定”,并引起了全球肿瘤学家、免疫学家和企业家的广泛关注[2]。笔者就ACI 发展历程、CAR-T 诞生、CAR-T 临床试验情况和所面临的挑战及其潜在应对策略作一探讨。

嵌合抗原受体（CAR）将单链抗体可变区与 T 细胞的活化基序相融合，使其修饰的 T 细胞具有非主要组织相容性复合物（MHC）限制性识别肿瘤抗原及杀伤靶细胞的双重功能。CAR 细胞内区的结构从表达单一信号分子的第1代，发展为添加1个及2个以上共刺激分子的第2代和第3代以及增加了编码 CAR 和/或其启动子、自杀基因等的第4代，使 T 细胞在体内的存活时间和杀伤能力明显增强且能够调控。本文就CAR-T细胞免疫治疗的原理、在血液系统恶性肿瘤中的应用以及主要不良反应和应对措施进行分析，发现应用CAR-T细胞免疫治疗多种血液系统恶性肿瘤取得了较好临床疗效，其中以靶向 CD19的CAR-T细胞免疫治疗疗效尤为突出，患者的生存期延长、生活质量改善并且不良反应较少。CAR-T细胞免疫治疗的主要不良反应是脱靶效应和细胞因子释放综合征，需要引起临床足够重视。

T淋巴细胞在肿瘤免疫应答中起主要作用,基于T细胞的过继性细胞免疫治疗(adoptive cellular immunotherapy,ACI)在血液肿瘤中取得了一定的效果.由于治疗特异性差,早期ACI对血液肿瘤进行免疫治疗的疗效并不十分理想.近年发展起来的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)基因修饰的T淋巴细胞(以下简称CAR T细胞)技术是一种非常有前景的新的ACI,其突出特点是高度特异性、非组织相容性抗原(MHC)限制性及强烈而持久的杀瘤效应.多种血液肿瘤细胞表面表达特异性抗原,这也就为CAR T细胞技术提供了良好的免疫治疗靶点.CD19和CD20可以作为B淋巴细胞白血病的治疗靶点,CD33可以作为髓细胞白血病的治疗靶点,CD30和CD22可以作为淋巴瘤的治疗靶点.近年来对恶性血液肿瘤的CAR T细胞技术的研究进展很快,本文就CAR结构及CAR T细胞技术在血液肿瘤治疗中的作用做一综述.

嵌合性抗原受体T细胞疗法在CD19表达阳性的血液系统恶性肿瘤中取得了惊人的效果.靶向CD19的CART细胞(CART CD19)可使急性淋巴细胞白血病的缓解率提高.然而,CART疗法对实体肿瘤的疗效近几年一直未有实质性的突破.实体肿瘤免疫治疗中存在诸多亟待解决的问题,如CART如何进入实体瘤微环境并在其中保持活力、怎样更加快速准确的识别肿瘤细胞、如何克服免疫抑制发挥作用等.本文主要探讨CART细胞治疗实体瘤所面临的挑战.