肿瘤细胞在恶性的进程中会将能量产生途径从氧化磷酸化转变为糖酵解，即使在有氧条件下也是如此。这一过程又称瓦伯格效应，而翻转这一效应可能为肿瘤治疗提供一种新的广谱策略。本文的研究人员将立足点放在了肿瘤细胞中的解偶联蛋白2（UCP2）这一线粒体膜转运蛋白。与其他家族成员相似，UCP2具有经典的解偶联效应，能将线粒体呼吸与ATP产生这一过程解偶联。
采用抗人4-1BBL单克隆抗体1F1包被24孔培养板,加入经免疫磁珠阴性选择获得的高纯度人外周血单核细胞,动态观察细胞的生长状态,并用3H-TdR掺入法分析单核细胞增殖,应用ELISA动态测定培养上清中IL-6、IL-10、M-CSF和FL等细胞因子水平.结果发现1F1非常有效地促进单核细胞的增殖,1F1组单核细胞分泌高水平的M-CSF以及IL-6和FL增加,但1F1组单核细胞分泌IL-10水平低于对照组(P<0.05).由此表明,抗人4-1BBL单克隆抗体1F1通过激发单核细胞4-BBL逆向信号,介导单核细胞分泌M-CSF、IL-6和FL.上述细胞因子联合作用,从而促进了单核细胞的增殖.
目的 探讨共刺激分子4-1BBL在人高转移性肺癌细胞株95D细胞的表达并在体外分析4-1BBL逆向信号对95D细胞的功能影响.方法 采用免疫荧光和流式细胞术及RT-PCR检测4-1BBL分子在95D细胞中的表达,进而在体外采用可溶性4-1BB-Ig融合蛋白激发4-1BBL逆向信号,分析95D表达膜型负性免疫调节分子CD95L、PD-LI和B7-H3的变化.结果 95D细胞表达4-1BBL,4-1BB激发的逆向信号可上调95D细胞表达膜型CD95L、PD-LI和B7-H3.结论 体外研究结果提示共刺激分子4-1BBL表达于肿瘤细胞,4-1BBL逆向信号可能通过上调表达肿瘤细胞表而的负性免疫分子,参与肿瘤细胞的免疫逃逸机制.
目的:研究共刺激分子4-1BBL分子在人恶性血液病细胞系的表达及其生物学意义.方法:流式细胞仪检测4-1BBL分子在不同的人恶性血液病细胞系的表达;用可介导4-1BBL逆向信号的鼠抗人4-1BBL单抗(mAb 1F1)作用于8个不同的人恶性血液病细胞系,细胞计数法和3H-TdR掺人法评价细胞系的体外生长和增殖.结果:FACS结果显示4-1BBL分子在人恶性血液病细胞系上有不同程度的表达,其中髓性白血病细胞系U937、HL60及B淋巴瘤细胞系Raji、Daudi上呈现较高水平的表达.细胞计数和3H-TdR掺人实验结果表明mAb 1F1对髓性白血病细胞系U937和HL60,具有较强的促增殖效应.结论:共刺激分子4-1BBL分子在髓性白血病细胞系和B淋巴瘤细胞系上表达率较高;4-1BBL分子可通过介导逆向信号促进髓性白血病细胞系U937和HL60的生长和增殖.
目的 探讨4-1BBL逆向信号对人多发性骨髓瘤细胞株U266的促生长作用及其机制.方法 采用免疫荧光标记和流式细胞术检测U266细胞株表面4-1BBL分子的表达；采用抗人4-IBBL单抗(1F1)激发4-1BBL逆向信号,通过细胞计数及MTT法观察U266细胞增殖；通过细胞内细胞因子染色检测U266细胞内白细胞介素-6(IL-6)的合成,并利用中和性抗体阻断IL-6的生物学作用,观察IL-6是否参与了4-1BBL逆向信号对U266细胞的促增殖作用.结果 U266细胞表面高表达4-1BBL分子；细胞计数及MTr实验均表明单抗1F1明显促进U266细胞系生长；细胞内细胞因子染色示1F1促进U266自分泌IL-6增多.中和IL-6能够抑制单抗1F1对U266细胞促增殖作用.结论 U266细胞株高表达4-1BBL分子；4-1BBL逆向信号通过增加IL-6的产生,促进U266细胞的增殖；4-1BB/4-1BBL分子可能是对多发性骨髓瘤进行免疫干预的重要靶点.
目的 分析GL50在不同分化时期单核细胞来源树突状细胞(Mo-DCs)上的表达,探讨GL50信号对Mo-DCs的生物学作用.方法 用Ficoll 密度离心及贴壁法获得外周血单核细胞,经GM-CSF+IL-4常规方法诱导,并分别加入丝裂霉素处理的mock-L929和ICOS-L929细胞,6 d时,加入或不加入TNF-α培养3 d后收集细胞;另外,在上述ICOS-L929细胞处理组的单核细胞中加入不同浓度的GL50单克隆抗体11C4或小鼠同型IgG,加入或不加入TNF-α,继续培养3 d后,收集细胞,免疫荧光标记和流式细胞术分析Mo-DCs表型(GL50、CD80、CD83、CD86)、摄取FITC-Dextran抗原的能力;混合淋巴细胞反应检测Mo-DCs对T细胞的作用;ELISA方法检测对分泌细胞因子IL-2、IL-10的影响.结果 GL50分子在不成熟Mo-DCs上高表达,而随着Mo-DCs的成熟呈下调性表达;GL50单克隆抗体11C4能够有效地促进Mo-DCs的成熟,上调Mo-DCs表面分子(CD86、CD80、CD83、HLA-DR)的表达,降低Mo-DCs摄取FITC-Dextran的能力,同时能有效地促进细胞因子IL-10的分泌,而对IL-2的分泌没有显著影响.结论 GL50分子介导的逆向信号参与了Mo-DCs分化成熟的调节,GL50/ICOS是参与DC/T细胞相互作用的主要分子.
目的 研究4-1BBL分子在人急性单核细胞白血病细胞系U937和SHI-1的表达及促生长作用.方法 用流式细胞术(FCM)和RT-PCR法检测4-1BBL分子在U937、SHI-1细胞系的表达;将激发型4-1BBL单抗(1F1)与U937、SHI-1细胞系分别进行培养,细胞计数分析2个细胞系的生长情况;收集U937细胞的培养上清,ELISA法检测细胞因子.结果 FCM测得U937和SHI-1细胞有4-1BBL分子表达,RT-PCR法测得4-1BBL mRNA;细胞计数表明,1F1明显促U937、SHI-1细胞系生长(P＜0.01);ELISA示1F1与U937细胞共培养48 h,其上清液中IL-6含量(55.91±10.23)pg/ml,显著高于IgG1同型对照组的(12.14±3.8)pg/ml(P＜0.01).结论 U937和SHF1细胞系组成性表达4-1BBL分子;1F1与U937、SHI-1细胞的4-1BBL分子交联后,可促进U937、SHF1细胞系生长,诱导U937细胞分泌细胞因子IL-6.
