自然界中硒可分为无机硒和有机硒,无机硒指单质硒、硒酸盐和亚硒酸盐,其中某些硒酸盐和亚硒酸盐常被作为营养补充剂使用~([1]);有机硒可分为小分子有机硇化合物、硒蛋白、硒多糖等,其中,小分子有机硒化合物包括硒代氨基酸和非氨基酸硒化合物.硒蛋氨酸和硒半胱氨酸能够结合进入体蛋白,故称为蛋白硒氨基酸;所有与硒结合的蛋白称为含硒蛋白,其中由UGA密码子编码的硒半胱氨酸参入的蛋白称为硒蛋白;其他不能结合进人体蛋白的硒代氨基酸则被称为非蛋白硒氨基酸,如甜菜碱、甲基硒代半胱氨酸及其谷氨酰胺衍生物等,非蛋白硒氨基酸和非氨基酸硒化合物合称非蛋白硒化合物.
目的 建立一种适用于检测硒蛋白中硒代氨基酸的有效方法.方法 硒蛋白样品采用酸脱蛋白质的方法,在酸性条件下使蛋白质变性沉淀,取沉淀物运用蛋白酶K、胰蛋白酶、链蛋白酶酶解硒蛋白样品;在5 mmol/L的柠檬酸铵中加2%的甲醇溶液作为流动相,并用柠檬酸或氨水精确调节流动相的pH值(pH=4.9),用离子交换柱分离硒代半胱氨酸(SeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)等硒代氨基酸,通过ICP-MS检测其含量,并运用方法学验证实验结果.结果 所建立的硒蛋白中硒代氨基酸检测方法,检出限分别为3.5μg/kg、11.2 μg/kg,线性范围(以Se计)为0μg/L~ 200 μg/L,加标回收率为75%~ 120%.结论 经实验证明,该检测方法适用于食品营养强化剂硒蛋白中硒代氨基酸的分析,此方法的建立对食品的成分分析和食品的开发利用具有重要意义.
对近年来硒蛋白中硒代氨基酸形态分析领域最新的研究成果,包括从硒蛋白中硒代氨基酸的提取技术、分离技术、检测技术等方面进行了综述.
硒是动物体必需的微量元素,对于硒的研究,古今中外积累了大量系统的资料,本文针对硒的营养、硒的代谢、硒的分子生物学与硒的补给方面作了综述,并对当前补硒现状谈了看法,仅供参考.
建立一种适用于检测硒蛋白中硒代氨基酸的方法,使其应用于食品中营养强化剂硒蛋白的检测。用酶解硒蛋白;5mM 的柠檬酸铵加2%的甲醇溶液作为流动相,离子交换柱分离硒代氨基酸;ICP/MS检测硒代氨基酸的含量。用蛋白酶K、胰蛋白酶、链蛋白酶酶解,并用柠檬酸调节流动相的 pH 值(pH=4.9)能够成功分离SeCys、SeMet等硒代氨基酸。检出限分别为:3.5μg/kg、11.2μg/kg;线性范围为:以 Se计为0~200μg/L;加标回收率为:75%~120%。该方法能适用于硒蛋白中硒代氨基酸的分析。