锁骨是上肢与躯干的连接和支撑装置,呈S形.近端与胸骨柄形成胸锁关节,远端与肩峰形成肩锁关节.外侧有喙锁韧带固定锁骨.
以染料法(SYBR Green I)实时荧光PCR并结合基因熔解曲线峰形来监测慢性乙型重型肝炎(慢乙重肝)患者(健康献血者为对照)外周血T细胞受体B链基因(TCRBV)克隆特异性扩增情况,从而可能反映慢乙重肝患者对HBV感染的免疫应答状态.
目的:本文以利福平与盐酸环丙沙星为实例揭示高效液相色谱(HPLC)中溶解溶剂对峰形与含量测定的影响.方法:采用甲醇、水与流动相等为溶剂,记录不同溶剂情况下利福平与盐酸环丙沙星的高效液相色谱图的峰形与含量的变化.结果:不同溶剂情况下利福平与盐酸环丙沙星的高效液相色谱图的峰形与含量变化均很大.结论:高效液相色谱测定时以流动相为溶剂溶解样品为最佳,可保证样品的峰形以及测定结果的准确与精密.
色谱系统的适用性试验通常包括分离度、理论板数、重复性和拖尾因子等四个指标.不理想的峰形通常表现为坡形峰、峰拖尾、宽峰等形状,实际上是合并出现的.上述峰形的分离度降低、塔板数降低、拖尾因子增大,峰面积积分值不准确,影响测定结果的准确性.本文所说的更好的HPLC峰形就是指以上四个指标都超过或接近《中国药典(2005年版)》所规定的指标的图谱.以下是我们在中药含量测定工作中摸索累积的一些经验,现发表出来,愿与大家交流.
微分电位溶出分析预镀汞膜法重现性好,但由于汞膜厚度增加,表面不均匀,测定灵敏度有所降低[1].我们将TritonX-100非离子型表面活性剂应用于镉的检验中,发现它能明显地提高分析的灵敏度和重现性,改善了溶出峰形,使汞膜电极的使用时间明显延长.
参照<苯酚、氢醌--高效液相色谱法(HPLC)>[1],对市售的近30种化妆品的氢醌、苯酚同时进行测定.结果表明,方法简单,分离效果好,灵敏度较高.同时还发现该方法中未曾提及的:氢醌的峰形及判断;样品提取过程中的乳化现象及解决;不同波长对测定的影响等问题.
1 病例 女,17岁.因先天性蹼颈入院.查体:身材矮小(128cm),招风耳,水牛背,颈短而宽,在颈的两侧自乳突至肩峰形成两片纵行的蹼状皮膜.颈后发际低而宽,颈蹼上生长较多头发.
目的 探讨疏水层析纯化重组汉逊酵母(Hansenula polymorpha,HP)表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)层析图谱与蛋白含量及HBsAg含量的相关性.方法 采用疏水层析纯化8批HP-HBsAg小量试验样品和5批小量验证试验样品及5批酿酒酵母表达的HBsAg对照试验样品,采用Lowry法和电化学发光法(Electrochemiluminescent immunoassay,ECLIA)分别检测纯化样品中蛋白含量和HBsAg含量,并计算HBsAg的回收率；通过几何法封闭紫外监测图谱特征峰图形,用数字求积仪采用积分法求出各封闭特征峰的图形面积,并进行分析；取小量验证试验1批样品的层析主峰和副峰收液进行电镜观察.结果 8批HP-HBsAg小量试验和5批HP-HBsAg小量验证试验HBsAg的平均回收率分别为70％和54％.HP-HBsAg疏水层析图谱由两部分构成:穿透峰和目标峰(HBsAg峰),目标峰可见高低不同的两个峰(主峰与副峰)；对照图谱中有穿透峰和目标峰.对目标峰进行量化分析,主峰、副峰与目标峰的面积比值分别与其所对应的收集量、蛋白含量和HBsAg含量比值相关.电镜观察可见小量验证试验样品主峰收液中HBsAg颗粒大小均一,副峰收液中HBsAg颗粒大小不均一.结论 疏水层析纯化重组HP表达的HBsAg效果良好,通过峰形之间面积比值,可获得峰形所对应的收集量、蛋白量和HBsAg量比值,为HBsAg的进一步纯化提供了参考.
乙酰螺旋霉素胶囊溶出度按<中国药典>1995年版附录二法测定,在实际测定中,发现供试品溶液与对照溶液的吸收图谱的最大吸收波长和峰形均明显不同,发现空心胶囊囊壳对供试品溶出度存在明显干扰.我们采用改进方法后,消除了干扰,测定结果满意.
患者:女,14岁.因颈部短小,活动受限10年入院.查体:血压24.5/15kpa(1kpa=7.5mmHg).患者身材矮小,颈短而宽,在颈的两侧自乳突起至肩峰形成两片纵行的蹼状皮膜,蹼颈后面有毛发生长,质地柔韧,无压痛(见图1,2).颈部左右旋转功能受限,约15°,前屈后伸功能基本正常.双肘外翻畸形.外生殖器为女性特征.B超检查示:卵巢缺如,子宫发育不良.
国家标准方法中测定可乐型饮料中咖啡因含量时所用的流动相为甲醇+乙腈+水[1],该法在实际操作中发现易造成峰形重叠,干扰检测结果.
目的 快速测定马来酸氯苯那敏的含量.方法 通过改变色谱条件(流动相的比例、柱温、流速,挑选色谱柱)用高效液相色谱法测定马来酸氯苯那敏的含量.结果 7min左右出峰,理论塔板数为10165,峰形良好,马来酸氯苯那敏的含量与车间理论投料量接近.结论 改进方法可用样品的质量控制.
益康唑为抗真菌药物,广泛用于各种真菌疾患的治疗,其制剂一般为注射剂、软膏和栓剂.关于益康唑的测定,文献报道较少,常见的有非水碱量法和GC法,前者常用于原料药分析,后者多用于制剂分析,但GC法处理样品费时,尤其药物碱性强,极性大,峰形有拖尾.近来又有文献报道采用HPLC法,虽方法准确、专属,但也同样存在着由于药物极性较大,易强吸附造成峰形拖尾.为了寻找测定益康唑的简单、快速方法,我们采用双波长分光光度法,只需将大部分的基质滤除,就可直接用于测定益康唑软膏中益康唑的含量.
目的:建立一种能够有效地测定奥沙利铂左旋异构体的高效液相色谱法.方法:称取2份适量的外消旋体草酸铂,一份用去离子水溶解,另一份用流动相溶解,均配制成1.0 mg·mL-1的溶液;另称取2份一定量的奥沙利铂,一份用去离子水溶解,另一份用流动相溶解,均配制成1.0 mg·mL-1的溶液.色谱条件:手性色谱柱为日本Daicel化学工业公司Chiralcel OC(250 mm ×4.6 mm,10 μm),填料为甲氨酸酯纤维素衍生化合物吸附硅胶;流动相为甲醇-乙醇(70:30);流速为0.5 mL·min-1;检测波长为250 nm;柱温为室温;进样量20μL.结果:样品用流动相溶解测得奥沙利铂与其左旋异构体的分离度为3.4,理论塔板数为6498,而且峰形好,不出倒峰,符合奥沙利铂的质量标准规定.而样品用水溶解测得奥沙利铂与其左旋异构体的分离度为1.4,理论塔板数为1246,峰形不好,有倒峰,不符合奥沙利铂的质量标准规定.结论:建立了一种能够有效地测定奥沙利铂左旋异构体的高效液相色谱法.
