目的:构建变形链球菌表面蛋白基因(pac)唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1.方法:用PCR扩增的含变形链球菌表面蛋白唾液粘附区P1片段(184-1946bp)与植物的高效表达质粒pROKCP结合,构建pROP1表达质粒;且将此质粒与Bar基因(抗除草剂基因)连接,构建表达质粒pRPB1,酶切电泳检测.结果:从pPC41中扩增的P1片段整合到pROKCP的适当部位,构成重组质粒pROP1,从pPBar分离出的Bar基因整合到pROP1,构成重组质粒pRPB1.结论:本实验成功地构建了携带变形链球菌表面蛋白唾液粘附区的植物表达质粒pROP1和pRPB1.
【目的】 对转基因植物表达质粒pROP1中含SBR基因P1片段(1 84~1946 bp)进行序列测定和分析。【方法】 从E.coli DH5α中提取质粒pROP1,用P CR测序试剂盒和DNA自动测序仪检测P1片段的序列,并与GenBank上的变形链球菌表面蛋白基 因序列比较,检测其准确性。【结果】 测定了P1片段5′端616个碱基序列和3′端466个碱 基序列,其准确性达98%。【结论】 PCR扩增的P1片段5′端和3′端的DNA序列与变形链球 菌表面蛋白pac基因唾液粘附区相一致,为转基因番茄防龋疫苗的研究提供了基础资料。