目的:检测造血祖细胞激酶1(HPK1)在人非特异型浸润性乳腺癌组织及乳腺癌细胞中的表达,并构建HPK1慢病毒载体以探究HPK1过表达对人乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响.方法:采用Western blot检测48例乳腺癌组织和配对癌旁组织中HPK1蛋白的表达,采用Western blot、RT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞(MCF10A)和乳腺癌MCF-7细胞中HPK1的表达水平.PCR扩增HPK1序列,构建慢病毒pCDH-HPK1-puro重组载体,包装病毒、转染MCF-7细胞(过表达组),以感染空载体病毒的MCF-7细胞作为对照组,分别采用Western blot、RT-PCR检测2组细胞HPK1的表达水平,MTT法检测细胞增殖能力的变化,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期.结果:与癌旁组织相比,HPK1蛋白在乳腺癌组织中低表达(P=0.036).与MCF10A细胞相比,HPK1蛋白及mRNA在MCF-7细胞中低表达;与对照组相比,过表达组中HPK1蛋白及mRNA的表达水平上调,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率升高,G0/G1期细胞比例升高(P均<0.05).结论:HPK1在乳腺癌组织及细胞中低表达,HPK1过表达可抑制MCF-7细胞增殖和诱导凋亡,并使细胞周期阻断在G0/G1期.

目的:探讨乳腺癌中Kif2a、HPK1表达量与癌基因 、耐药性基因表达的相关性.方法:收集在本院接受手术治疗的乳腺癌患者91例 、乳腺腺瘤组患者85例,分别留取术中乳腺癌组织 、乳腺腺瘤组织作为研究标本.采用荧光定量PCR法检测标本组织中Kif2a、HPK1基因,癌基因及耐药性基因的表达量,采用Pearson检验评估乳腺癌组织中Kif2a、HPK1基因表达量与癌基因 、耐药性基因表达量的内在联系.结果:乳腺癌组织中Kif2a mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组织,HPK1 mRNA的表达量低于乳腺腺瘤组织;癌基因DEK、iASPP-SV、Stat3、MDM2、Fra-1 mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组织;耐药性基因ESR1、MDR1、P-gp、MRP1、GST-πmRNA的表达量高于乳腺腺瘤组织,BCRP mRNA的表达量低于乳腺腺瘤组织.相关性分析发现,乳腺癌组织中Kif2a、HPK1基因表达量与癌基因 、耐药性基因的表达量直接相关.结论:乳腺癌组织中存在Kif2a基因异常高表达以及HPK1基因异常低表达,参与癌基因 、耐药性基因表达的调控.