固有免疫系统通过模式识别受体( Pattern-recognition receptor,PRRs)识别病原相关分子模式( Pathogen associated molecular pattern,PAMP)或者损伤相关分子模式( Damage-associated molecular patterns,DAMP)来识别和清除外源性病原微生物和自身细胞释放的内源性分子.PRRs主要包括Toll样受体( Toll-like receptor,TLR)、NOD样受体(Nucleotide-binding oligomerization domain like receptor,NLR)、RIG样受体(Retinoicacid-inducible gene-like helicase,RLH)和C型植物血凝素受体(C-type lectin receptors,CLR).其中NLR感受病原体及危险信号后可组装形成炎性体;炎性体( Inflammasome)是一种细胞内大分子量的多蛋白复合体,能够激活炎性半胱天冬酶-1( Caspase-1),促进IL-1β和IL-18促炎因子的加工和成熟而发挥生物学效应,参与机体的固有免疫反应.
目的在大肠肝菌中表达完整的丙型肝炎病毒的解旋酶.方法用异硫氰酸胍法从HCV阳性的病人血清中提取RNA,经RT-PCR法扩增出NS3区的基因片段,将其克隆入PQE30表达载体中转化大肠杆菌XLI-Blue进行表达.表达出的蛋白用western blot方法鉴定.结果扩增出的基因片段大小为1350 bp,表达出的蛋白分子量为52 KD,经Western blot鉴定为阳性.结论成功地在大肠杆菌中表达出完整的HCV解旋酶蛋白,为HCV的诊断和疫苗研究奠定了基础.
