目的观察HIV-1辅受体CCR5和CXCR4的配体在细胞内共表达抑制HIV-1感染的作用. 方法应用磷酸钙沉淀法共转染HIV-1辅受体及其配体的质粒,制成辅受体表型剔除的靶细胞,与转染HIV-1膜蛋白质粒的细胞混合,观察合胞体形成并记数;脂质体介导法将含有报告基因CAT而缺失HIV包膜蛋白的质粒与HIV包膜蛋白质粒共转染293细胞,包装成具有一次感染活性的假病毒,感染转化pCMV-R-K-S-K、pCMV-R-K、pCMV-S-K 或pCMV的PM-1细胞,采用同位素薄层层析分析法检测CAT活性. 结果 pCMV-R-K-S-K转染可以显著抑制M及T嗜性HIV膜蛋白诱导的合胞体形成;CAT检测发现与pCMV转染组相比,当两种嗜性重组病毒感染pCMV-R-K-S-K转染组PM-1细胞时,仅检测到背景水平的CAT活性. 结论 HIV-1辅受体CCR5/CXCR4表型剔除可以明显抑制M和T嗜性HIV-1病毒进入靶细胞.

目的:建立一个基于细胞-细胞融合的HIV进入抑制剂非感染性筛选方法.方法:将稳定表达HIV包膜蛋白gp160的效应细胞与含有或稳定表达HIV受体和辅助受体的靶细胞混合,观察合胞体的形成.用特异性的HIV进入抑制剂对检测方法进行验证.结果:本研究比较了2种效应细胞与5种靶细胞的10种组合,发现将CHO-WT和MT-2细胞混合,可形成明显的合胞体.进一步发现特异性的HIV进入抑制剂能够抑制合胞体的形成,且具有剂量依赖性.结论:这一方法能特异性地筛选作用在HIV进入阶段的抗HIV药物,操作简单方便,且无感染性,可望发展成为一个无感染性的多靶点高内涵药物筛选模型,用于天然和合成来源的小分子HIV进入抑制剂的筛选.