肠毒素性大肠杆菌(entertoxigenic escherichia coli,ETEC)是婴幼儿腹泻的主要病原菌.Wenneras 等[1]估计每年全球5岁以下儿童因ETEC感染的病例高达2亿人次,ETEC也是到发展中国家旅游者腹泻的主要病原菌,30%~60%的旅游者腹泻由ETEC所致[2].
肠毒素性大肠杆菌的致病性与其具有粘附性的菌毛和产肠毒素的能力密切相关.由于菌毛的血清型多而复杂,肠毒素只有不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)两种,因此成为研究的对象.用三对扩增产物分别为110bp、237bp、368 bp的引物建立了检测LT和STⅠ、STⅡ毒素基因的多重PCR方法.扩增产物分别用HindⅢ、HincⅡ、Sau3AⅠ限制性内切酶酶切,均得与预期一致的2个片段.对各个参考株的检测结果为100%符合.结果表明该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性.该方法可用于肠毒素性大肠杆菌腹泻病的辅助诊断以及大肠杆菌的分类检测.