目的 为了提高赤潮藻毒素GTX_(2,3)检测方法的灵敏度,以抗GTX_(2,3)单抗-纳米金-DNA为基础,建立检测GTX_(2,3)高灵敏度的免疫吸附生物条码方法.方法 制备腹水型GTX_(2,3)单克隆抗体,饱和硫酸铵、辛酸硫酸铵和Protein A亲和层析法进行纯化.确定单抗与纳米金标记偶联物的最佳pH和最小蛋白浓度,制备单抗-纳米金-DNA,应用于竞争ELISA建立免疫吸附生物条码检测技术.结果 在pH8.5、0.096 mg/mL抗体浓度下成功偶联GTX_(2,3)单抗和纳米金,并制备出GTX_(2,3)单抗-纳米金-条码DNA复合物,建立的检测GTX_(2,3)的免疫吸附生物条码检测法灵敏度为0.74μg/mL.结论 本研究建立了GTX_(2,3)高灵敏的免疫吸附生物条码法.
