目的:对Daintain/AIF-1(大炎肽/同种异体移植炎症因子-1)基因启动子进行克隆并构建荧光素酶报告基因载体,为进一步研究Daintain/AIF-1的转录调控作用提供了质粒资源.方法:提取单核巨噬细胞系RAW264.7基因组DNA.以其为模板采用PCR方法克隆出Daintain/AIF-1基因5'端UTR区1.6 kb DNA序列,将该序列同源重组到pGL3-Basic载体上,转化感受态DH5α并酶切鉴定和测序.结果:PCR产物片段与预期结果一致,Daintain/AIF-1 基因5'端UTR区1.6 kb DNA序列连接到pGL3-Basic载体上,构建成pGL3-Basic-Daintain/AIF-1(pGL3-Basic-DT)栽体,酶切结果与理论预测值一致,经测序证实无碱基突变.结论:Daintain/AIF-I基因报告基因载体的构建为进一步研究Daintain/AIF-1转录调控作用提供了载体资源.
