目的 运用实验设计(Design of Experiment,DOE)方法优化筛选表达胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)融合蛋白的CHO细胞用培养基,以提高细胞生长密度及目的 蛋白表达量.方法 采用Minitab软件对实验进行DOE优化筛选.考察不同基础培养基、流加培养基及其策略优化对CHO活细胞密度(viable cell density,VCD)与GLP-1融合蛋白表达的影响,确定最适培养基组合.结果 从15种基础培养基中筛选出3组基础培养基,从5种流加培养基中筛出1种流加培养基,并在此基础上优化了相关流加补料策略.经最适培养基组合验证,试验组CHO细胞的VCD最高为(19.90±0.78)×106个/mL,对照组最高为(14.30±0.60)×106个/mL;试验组GLP-1融合蛋白表达最高为2.51g/L,对照组小于1.51 g/L,目的蛋白表达量优化后较优化前提高了80％以上.结论 优化后的培养基组合显著提高了CHO细胞生长密度及目的蛋白产量,DOE方法是一种短期快速提高蛋白表达的有效方法.