目的:在人PBMCs内表达CCR5Delta32蛋白,研究其对细胞表面HIV-1辅受体CCR5和CXCR4的抑制作用.方法:构建pLenti-CCR5Delta32慢病毒载体,包装后产生重组慢病毒.将其转染PBMCs,Western blot检测目的蛋白的表达.继续培养靶细胞,FACS分析细胞表面CCR5和CXCR4分子的变化.结果:成功构建了pLenti-CCR5Delta32慢病毒载体,包装后产生重组慢病毒.将其转染PBMCs,Western blot检测到目的蛋白的表达.FACS分析表明,靶细胞内目的蛋白的表达对靶细胞表面辅受体CCR5和CXCR4的产生起抑制作用,抑制率在转染后第6天达到高峰(CCR5的抑制率为51.69%,CXCR4的抑制率为61.05%).结论:靶细胞内目的蛋白的成功表达及其对靶细胞表面HIV-1辅受体CCR5和CXCR4产生的抑制作用,为后续的AIDS基因治疗研究奠定了基础.
