H7N9禽流感病毒HA基因在杆状病毒中的表达及检测
摘要：
目的 利用昆虫杆状病毒表达系统表达H7N9禽流感病毒血凝素(HA)基因,获得重组HA蛋白,并验证其活性.方法 全基因合成H7N9禽流感病毒全长HA基因,将HA基因进行扩增并克隆到pFastBacI载体中,构建重组杆状病毒表达载体,经PCR鉴定后将其转染昆虫sf9细胞,再采用SDS-PAGE实验和免疫印迹法检测重组HA蛋白的表达.HA蛋白经纯化后,采用血凝试验鉴定其红细胞凝集活性.结果 PCR结果显示重组杆状病毒表达载体的扩增产物大小约为4000 bp,SDS-PAGE电泳显示纯化的表达蛋白分子量为63 KD,免疫印迹检查结果显示表达蛋白可以与特异性HA抗体进行反应,产生条带与理论大小相当.血凝试验结果显示表达的蛋白能使红细胞凝集,滴度为1:64.结论 禽流感H7N9的HA蛋白在重组杆状病毒中获得表达,并具有血凝活性.
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doi：
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关键词：
禽流感
病毒
基因表达
HA蛋白
杆状病毒表达系统
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Keyword：
Avian influenza
Virus
Gene expression
HA protein
Baculovirus expression system
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作者：
王平
蔡明毅
沈琦
任静
赵文良
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Author：
Wang Ping
Cai Mingyi
Shen Qi
Ren Jing
Zhao Wenliang
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作者单位：
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刊名：
国际病毒学杂志
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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页数：
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页码：
