用于我国新生儿HIV-1感染早期诊断的单管降落巢式三重PCR检测方法的建立
摘要：
目的 我国面临着艾滋病母婴垂直传播的挑战.发展经济、有效的新生儿HIV-1感染早期诊断方法至关重要.本研究拟结合降落PCR、巢式PCR、多重PCR技术,以期建立一种能够在同一个PCR反应体系中同时扩增Env、Gag、Pol三个基因区的单管降落巢式三重PCR方法用于我国新生儿滤纸干血斑样本(DBS)中的HIV-1前病毒DNA检测,并对所建立的方法进行初步评价.方法 样本采自云南、新疆、广西、河南四省HIV-1阳性母亲所生婴儿.用18个DBS样本进行方法优化(感染婴儿及未感染婴儿样本分别9个).采用由重组质粒及8E5细胞制备的涵盖HIV-1各亚型的DNA稀释盘确定方法的亚型适用性及检测下限.采用134个DBS样本进行临床评价(含25个感染婴儿的64个DBS样本及30个未感染婴儿的70个DBS样本).结果 所建方法对HIV-1 A、AE、AG、B、BC、C、D、F、H亚型均可适用,检测下限为3拷贝/PCR反应体系；其临床特异度100％,阳性检出率在3月龄时接近95％、6月龄时可达到100％.结论 本研究建立的方法能够检测出我国新生儿DBS样本中各亚型的HIV-1前病毒DNA,且省时、省力、节约成本,在我国新生儿HIV-1感染的早期诊断领域具备应用潜力.
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doi：
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关键词：
新生儿
HIV-1
诊断
单管
三重PCR
干血斑
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Keyword：
infants
HIV-1
diagnosis
one tube
triplex PCR
dried blood spots
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作者：
苏雪丽
姚均
蒋岩
王临虹
韩剑锋
张麒
卢红艳
贺雄
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Author：
SU Xue-li
YAO Jun
YAN Jiang
WANG Lin-hong
HAN Jian-feng
ZHANG Qi
LU Hong-yan
HE Xiong
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作者单位：
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刊名：
国际病毒学杂志
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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页数：
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