目的 了解人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染THP-1源性巨噬细胞后对细胞自噬的影响.方法 构建HCMV感染THP-1源性巨噬细胞模型,分别设HCMV感染组(HCMV组)、热灭活HCMV感染组(Heat-HCMV组)、模拟感染对照组(M组)和雷帕霉素(rapamycin,400 nmol)自噬阳性对照组(RAPA组),病毒感染复数=1.采用western blot检验测量各组自噬相关蛋白Beclin1表达量和LC3转化量(LC3-II/LC3-I)在感染后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h的动态变化,并用透射电镜观察感染后6 h、12 h和24 h各组细胞胞质中自噬泡形成的数量.结果 在HCMV感染组,HCMV感染THP-1源性巨噬细胞后1 h,自噬相关蛋白Beclin1表达量明显增高,高于模拟感染组.LC3转化量在感染后6 h明显增高,高于模拟感染组.感染后24 h和48 h,Beclin1表达量和LC3转化量都降低,且均低于RAPA阳性对照组.用热灭活HCMV处理THP-1源性巨噬细胞,Beclin1在1 h就开始明显高表达,高于模拟感染组.LC3转化量在6 h开始明显增高,高于模拟感染组.用透射电镜观察到在HCMV感染THP-1源性巨噬细胞后6 h,自噬泡数目明显增加,但感染后24 h明显降低.热灭活HCMV处理THP-1源性巨噬细胞后6 h,自噬泡明显增加,并持续到48 h.结论 HCMV感染THP-1源性巨噬细胞早期可激活细胞自噬,其激活方式可能并不依赖于HCMV复制,而感染后期细胞自噬受到抑制,这可能与HCMV复制等因素有关,但需进一步实验证实.
