在现有标准GB/T 5009.197-2003的基础上，优化一种合理、快速的基于高效液相色谱分离，能同时测定烟酸、烟酰胺、咖啡因、维生素B1和维生素B65种成份的方法。探讨流动相、色谱柱、检测波长、稳定性等对上述5种成份分离的影响。结果显示，该方法标准曲线线性非常好，R大于0.99999，RSD为1.1%～1.5%，样品加标回收率为98.5%～103.2%。可用于烟酸、烟酰胺、咖啡因、维生素B1和维生素B65种成份的同时检测，本法具有灵敏度高、重现性好、快捷高效等特点。
