多重PCR方法鉴定六类致泻性大肠埃希菌和志贺菌
摘要：
目的 建立一种快速检测和鉴定六类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的多重PCR方法.方法 根据六类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的毒力基因eae、stx1、stx2、elt、estIa、estIb、aggR、ipaH、afaD及16S rRNA基因rrs建立多重PCR反应体系,优化引物浓度、PCR反应条件等,评价该方法的特异性和灵敏度,并用该方法鉴定本实验室保存的174株致泻性大肠埃希菌和24株志贺菌,将结果与单重PCR、本实验室已建立的鉴定五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的多重PCR方法结果进行对比.结果 10对PCR引物均可特异性扩增相应基因片段.该反应体系对174株致泻性大肠埃希菌和24株志贺菌的鉴定结果与单重PCR检测结果一致,本研究的多重PCR检测下限可达4.56×101CFU/反应(1.14×104CFU/ml).结论 本研究采用毒力基因及内参照基因建立的多重PCR方法可在一个反应体系中鉴定和区分致泻性大肠埃希菌和志贺菌,为临床快速检测、疾病预防控制实验室筛查、腹泻的暴发溯源等提供了方便快捷的技术支持.
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doi：
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关键词：
致泻性大肠埃希菌
多重PCR
毒力基因
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Keyword：
Diarrheagenic E.coli
Multiplex PCR
Virulence gene
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作者：
张网
白向宁
赵爱兰
许彦梅
熊衍文
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Author：
ZHANG Wang
BAI Xiang-ning
ZHAO Ai-lan
XU Yan-mei
XIONG Yan-wen
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作者单位：
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刊名：
疾病监测
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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